Методика поверки «Анализатор биомолекулярный Biacore 3000» (МП 009-12-17)

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель

ИЦ ФГУП «ВНИИМС»

Настоящая методика распространяется на анализатор биомолекулярный Biacore 3000 (далее - анализатор биомолекулярный) заводской номер 1870591 фирмы «GE Healthcare Bio-Sciences АВ», Швеция и устанавливает методику их первичной и периодической поверки.

Интервал между поверками - 1 год.

• 1.1 При проведении первичной и периодической поверки выполняют операции, указанные в таблице 1.

Таблица 1

• 2.1 При проведении поверки применяют средства поверки, приведенные в таблице 2.

Таблица 2.

• 2.2 Допускается применение других средств измерений и оборудования с техническими и метрологическими характеристиками не хуже указанных.

• 2.3 Все используемые средства поверки должны быть исправны, поверены и иметь действующие свидетельства о поверке, стандартные образцы утвержденных типов должны иметь действующие паспорта.

• 3.1 К проведению поверки анализаторов биохимических допускаются лица, изучившие эксплуатационные документы на них, имеющие достаточные знания и опыт работы с ними и аттестованные в качестве поверителя.

• 3.2 При проведении испытаний следует соблюдать требования, установленные правилами по охране труда, ПОТ РМ-061-2001, РД 153-34.0-03.150-00 и ГОСТ 12.1.005-88.

• 4.1 Требования безопасности должны соответствовать рекомендациям, изложенным в руководстве по эксплуатации на прибор.

4.2При выполнении поверки соблюдают правила техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности по ГОСТ 12.1.019-79 и пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

При проведении поверки в лаборатории должны соблюдаться следующие нормальные условия измерений:

• 6.1 Подготавливают анализатор биомолекулярный к работе в соответствии с требованиями руководства по эксплуатации.

• 6.2 Готовят контрольный раствор ГСО рекомбинантного токсина в соответствии с Приложением 1.

• 7.1 Внешний осмотр

При внешнем осмотре устанавливают:

-отсутствие механических повреждений и ослабленных элементов конструкции, сохранность пломб, чистоту разъемов состояние соединительных кабелей;

-целостность корпуса, внешних элементов, отсутствие повреждений органов управления.

Не допускаются дефекты, которые могут повлиять на работоспособность прибора.

• 7.2 Опробование

Опробование производится автоматически. Включают питание прибора, после чего индикаторы состояния на передней панели горят в следующей последовательности:

• 1) Все индикаторы горят в течение нескольких секунд и затем гаснут.

• 2) Загорается зеленый индикатор Ready.

• 3) Желтый индикатор Temperatine мигает, указывая на нестабильную температуру, а затем горит постоянно, пока температура в измерительном устройстве не стабилизируется. Время стабилизации температуры зависит от заданной температуры и температуры окружающей среды. Изменение температуры на 5 °C происходит приблизительно в течение 1 часа.

После окончания стабилизации температуры подключантся ПК и запускается ПО Biacore 3000 Control Software.

Результаты опробования положительные, если сообщений об обнаруженных ошибках не возникает. В противном случае анализаторы биомолекулярные к дальнейшей поверке не допускаются.

• 7.3 Проверка идентификационных данных программного обеспечения масс-спектрометра.

Идентификационные данные ПО Biacore 3000 Control (наименование и номер версии ПО, рисунок 1) выводятся при вызове окна About BIACORE. Цифровой идентификатор программного обеспечения (контрольная сумма исполняемого файла) вычисляется по алгоритму MD5.

Идентификационные данные ПО BIAevaluation (наименование и номер версии ПО, рисунок 1) выводятся при вызове окна About BIAevaluation. Цифровой идентификатор программного обеспечения (контрольная сумма исполняемого файла) вычисляется по алгоритму MD5.

Совпадение идентификационных данных запущенного ПО с данными, приведенными в таблице 3 является положительным результатом проверки идентификационных данных ПО.

About BIACORE

This software is licensed to:

Institute named after Gamalei

ImmunoBioTechnology

Serial number 00^2-0820

Version: 4.1.2                       10*721

Instrument Id: 1870591

Configuration: IFC6

© 1998-2008 General Electric Company - Al rights reserved.

Details Acknowledgements

Рисунок 1 - Идентификационные данные ПО Biacore 3000 Control

Рисунок 2 - Идентификационные данные ПО Biacore 3000 Control

Таблица 3

• 7.4 Определение метрологических характеристик

  • 7.4.1 Определение относительной погрешности и диапазона измерений концентрации белков анализатора биомолекулярного

Перед проведением измерений производится градуировка по стандартному образцу массовой концентрации рекомбинантного токсина Clostridium difficile в физиологическом буфере (ГСО 10920-2017).

Для этого ГСО разводят буфером для проведения анализа и разведения образца до концентраций, указанных в таблице 4. В качестве отрицательного контроля используют фосфатно-солевой буферный раствор.

Таблица 4

Последовательно проводят измерения пяти контрольных растворов. Для этого в пробирки для использования в автоматической системе детекции переносят контрольный раствор.

Микрочип, емкость с буфером для проведения анализа, пробирки с раствором ГСО 10920-2017 и отрицательным контрольным образцом загружают в анализатор био-молекулярный. Проводится процедура промывки системы и поверхности микрочипа буфером для проведения анализа, при этом используется стандартный алгоритм промывки, вызываемый в автоматическом режиме командой Prime. Затем в приборе устанавливается 2 канала для детекции поверхностного плазмонного резонанса на поверхности микрочипа, один из каналов соответствует отрицательному контролю поверхности чипа (Fcl), другой - измерительному каналу (Fc2).

В настройках отображения сигнала устанавливается показ результирующей кривой значений по двум каналам, которая представляет собой значения RU контрольного канала с вычетом значений RU отрицательного контроля поверхности чипа:

Flow cell = Fc2-Fcl.

Скорость потока образца устанавливается на уровне (Flow - 25 мкл/мин). Затем осуществляется загрузка отрицательного контрольного образца в объеме 100 мкл путем вызова соответствующей команды в системе управления прибора - inject position N1.

После этого осуществляют загрузку контрольного раствора ГСО 10920-2017 в объеме 100 мкл - inject position N2 и определяют значение RU.

После этого поверхность чипа регенерируется путем двух последовательных вколов 30 мкл регенерирующего раствора путем вызова соответствующей команды в системе управления прибора - quick inject position N3 и измеряется концентрация следующего контрольного раствора.

По полученным данным строят калибровочный график зависимости значений RU от концентрации ГСО 10920-2017, как показано на рисунке 1.

Рисунок 1 - Калибровочный график

Для определения погрешности изменений анализатора биомолекулярного проводят измерения в трех точках: 7нг/мкл, бОнг/мкл, 120нг/мкл. Значение концентраций определяют по калибровочному графику.

Измеренные значения должны находится в диапазонах приведенных в таблице 5.

Таблица 5

Значение относительной погрешности при измерении концентрации не должно превышать 17%.

• 8.1 Результаты поверки заносят в протокол (Приложение 2).

• 8.2 Положительные результаты поверки оформляют выдачей свидетельства по форме, установленной приказом Минпромторга РФ № 1815 от 02.07.2015.

• 8.3 Анализатор биомолекулярный, не удовлетворяющие требованиям настоящих рекомендаций, к эксплуатации не допускаются. Свидетельство о поверке изымают и выдают извещение о непригодности.

• 8.4 После ремонта анализаторы биомолекулярные подвергают поверке.

• 8.5 Знак поверки наносится на боковую панель СИ.

  

  В. Кулябина

  

  Е.А. Гуськова

Начальник лаборатории 009 ФГУП «ВНИИМС»

Инженер лаборатории 009 ФГУП «ВНИИМС»

МЕТОДИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОНТРОЛЬНОГО РАСТВОРА

Методика предназначена для приготовления контрольного раствора ГСО 10920-2017.

• 1 СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ПОСУДА, РЕАКТИВЫ

  • 1.1 ГСО 10920-2017 массовой концентрации рекомбинантного токсина Closridium difficile в физиологическом буфере, массовая концентрации белка от 500 нг/мкл. Границы относительной погрешности при доверительной вероятности Р=0,95 составляет ±7%.

  • 1.2 Фосфатный забуференный физиологический раствор по ОФС.1.3.0003.15.

  • 1.3 Полипропиленовые пробирки, объем 1,5 мл.

• 1.5 Автоматические пипеточные дозаторы.

• 1.5 Наконечники для автоматических пипеточных дозаторов, 5000 мкл, 1000 мкл, 200 мкл, 20 мкл, 10 мкл.

• 2 ПРОЦЕДУРА ПРИГОТОВЛЕНИЯ

  • 2.1 Приготовление раствора ГСО с массовой концентрацией 6,25 нг/мкл

• 12.5 мкл ГСО с массовой концентрацией Closridium difficile 500 нг/мкл, переносят в полипропиленовую пробирку с помощью автоматического дозатора и доводят до метки 1 мл физиологическим раствором.

• 2.2 Приготовление раствора ГСО с массовой концентрацией 50 нг/мкл

100 мкл ГСО с массовой концентрацией Closridium difficile 500 нг/мкл, переносят в полипропиленовую пробирку с помощью автоматического дозатора и доводят до метки 1 мл физиологическим раствором.

• 2.3 Приготовление раствора ГСО с массовой концентрацией 150 нг/мкл

300 мкл ГСО с массовой концентрацией Closridium difficile 500 нг/мкл, переносят в полипропиленовую пробирку с помощью автоматического дозатора и доводят до метки 1 мл физиологическим раствором.

ПРОТОКОЛ ПОВЕРКИ

Анализатор биомолекулярный Biacore 3000

Зав. номер 1870591

Дата поверки _________________________________________________________

Условия поверки:

температура окружающего воздуха_____________________________________°C

относительная влажность_____________________________________________%

РЕЗУЛЬТАТЫ ПОВЕРКИ

Результаты внешнего осмотра

Результаты опробования

Результаты определения относительной погрешности и диапазона измерений

Заключение

Поверитель________________

И