Методика поверки «Хромато-масс-спектрометры жидкостные моделей 6470 Triple Quadrupole LC/MS System и 6495 Triple Quadrupole LC/MS System» (МП-242-1967 -2016)

УТВЕРЖДАЮ

15.05.2016 г.

им.Д.И.Менделеева»

Хромато-масс-спектрометры жидкостные моделей

6470 Triple Quadrupole LC/MS System и 6495 Triple Quadrupole LC/MS System

МП-242-1967 -2016

Руководитель отдела

ФГУП «ВНИИМ им.Д.И.Менделеева»

. Конопелько

Ст. научный сотрудник

ФГУП «ВНИИМ им.Д.И.Менделеева»

М.А.Мешалкин

С. Петербург 2016 г.

Настоящая методика распространяется на хромато-масс-спектрометры жидкостные моделей 6470 Triple Quadrupole LC/MS System и 6495 Triple Quadrupole LC/MS System, изготавливаемые компанией «Agilent Technologies Singapore Pte Ltd», Сингапур и устанавливает методы и средства их первичной поверки (до ввода в эксплуатацию и после ремонта) и периодической поверки (в процессе эксплуатации).

Интервал между поверками -1 год.

Таблица! - Операции поверки

• 1.    Колба Кн 01-100-14/23-ТСХ, ГОСТ 25336-82.

• 2.    Колба мерная 2(4)-50-2 ГОСТ 1770-74.

• 3.    Пипетка вместимостью 0,5 см³ по ГОСТ 29227-91.

• 4.    Весы лабораторные высокой точности по ГОСТ 53228-2008 с максимальной нагрузкой 20 или 200 г;

• 5.    Мешалка ММ-5 ТУ25-11-834-80.

• 6.    Вода 1-ой степени очистки по ГОСТ Р 52501-2005.

• 7.     Стандартный образец состава левомицетина ГСО 10165-2012.

• 8.    Метанол кв. «хч» по ТУ 6-09-1709-77.

• 9.    Барометр-анероид М-98 ТУ 25-11-1316-76.

• 10.   Т ермогигрометр электронный

Все средства измерений, используемые при поверке, должны иметь свидетельства о поверке, а ГСО и химические реактивы - действующие паспорта.

Допускается применение других средств поверки, допущенных к применению в РФ, с метрологическими характеристиками не хуже указанных.

Контрольные растворы готовятся согласно Приложению А к настоящей методике.

• 3.1. При проведении поверки должны быть соблюдены следующие условия:

• - температура окружающего воздуха, °C                 от 15 до 25;

• - допустимое изменение температуры в помещении, °С/час не более 1,0

• - атмосферное давление, кПа                             от 84 до 107;

• - относительная влажность воздуха, %, не более               80;

• - напряжение питания переменного тока, В                220⁺²².зз;

• - частота переменного тока, Гц                            от 49 до 51.

• 3.2. Перед проведением поверки прибор следует подготовить к работе в соответствии с руководством по эксплуатации.

Требования безопасности должны соответствовать рекомендациям, изложенным в Руководстве по эксплуатации

• 5.1. Приготовить поверочный раствор с массовой концентрацией левомицетина 0,5 пг/мкл. Методика приготовления поверочного раствора приведена в приложении Б.

• 5.2. Перед проведением измерений рекомендуется провести кондиционирование хроматографической колонки в соответствии с руководством по эксплуатации на жидкостный хроматограф.

• 5.3. К проведению измерений по поверке допускаются лица, изучившие техническое описание, руководство по эксплуатации и методику поверки хромато-масс-спектрометра и аттестованные в качестве поверителей.

Для получения данных, необходимых для поверки, допускается участие операторов, обслуживающих хромато-масс-спектрометр (под контролем поверителя).

• 6.1. Внешний осмотр.

При проведении внешнего осмотра проверяют:

• - отсутствие механических повреждений;

• - надежность крепления соединительных элементов.

• 6.2. Опробование.

  • 6.2.1. Запустить программу управления прибором, дождаться завершения операции по автоматическому тестированию. Результат автотестирования должен быть положительный.

6.2.2 Подтверждение соответствия программного обеспечения

• 6.2.2.1. Определение осуществляется следующим образом:

- в главном окне программы в строке команд щелкнуть мышью на команде Help. В открывшемся окне щелкнуть мышью по строке About, в результате чего откроется окно, в котором приведены идентификационное название ПО и номер версии. Кроме этого версия ПО указана в стартовом окне программы, приведенном на рисунке 1.

.              MassHunter

*■         '       Workstation Software

f*

LC/MS Data Acquisition f'*       *                    tor 6400 Series Triple Quadrupole

■                                        Version В 07 00 Build 7.0.70226 SPf

•? Agiloit ToHnioktyi*». Inc. 7014

.                                Q A.i.kutTectinologie!.                 SBE3HI

Рис.1 Окно с идентификационными данными ПО.

• 6.2.2.3. Хромато-масс-спектрометр считается выдержавшим поверку по п. 6.2, если номер версии ПО - В.07.00 или выше.

• 6.3. Определение метрологических характеристик.

  • 6.3.1. Установить параметры* хромато-масс-спектрометра, указанные в табл. 2.

Таблица 2 - Параметры хромато-масс-спектрометра

* - параметры имеют рекомендательный характер и могут быть изменены с целью оптимизации результатов измерения.

Таблица 3- Временная программа градиента

• 6.3.2.  Определение чувствительности (отношение сигнал/шум) хромато-масс-спектрометра

6.3.2.1 Ввести 2 мкл контрольного раствора с массовой концентрацией 0,5 пг/мкл левомицетина в 30 % метаноле в прибор и с помощью программного обеспечения определить отношение сигнал/шум¹ для перехода m/z 321,2 —> 152,0. Порядок действий при определении указан в приложении А к настоящей методике.

• 6.3.2.2. Повторить действия, указанные в п.6.3.2.1 еще два раза.

• 6.3.2.3. Результаты поверки по п 6.3.2 считаются положительными, если в серии из трех определений наименьшее значение отношения сигнал/шум не менее, чем указано в табл. 4.

Таблица 4 - Отношение сигнал/шум

6.3.3 Определение относительного СКО выходного сигнала.

• 6.3.3.1. Определение СКО выходного сигнала проводят по контрольному раствору с массовой концентрацией 0,5 пг/мкл левомицетина в 30 % метаноле.

• 6.3.3.2. Условия, при которых проводятся определения, указаны в п. 6.3.1.

• 6.3.3.3. Объем вводимой пробы - 2 мкл.

• 6.3.3.4. Последовательно ввести пробу в прибор и зафиксировать время удерживания и площадь пика левомицетина. Повторяют операцию пять раз. При этом недостоверные результаты измерений, которые можно оценить как выбросы (см. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002, п. 3.21; ГОСТ Р 8.736-2011), отбраковываются и не учитываются в расчетах. В случае обнаружения выбросов проводят необходимое дополнительное число измерений.

• 6.3.3.5. С помощью программного обеспечения определить относительное СКО выходного сигнала по площади пика и времени удерживания. Порядок действий при определении указан в приложении А к настоящей методике.

• 6.3.3.6. Возможно провести расчет СКО вручную по формуле:

  

  и—_;—,%

где: N - среднее арифметическое результатов п- измерений;

N* - k-е значение результата измерений; п - число измерений.

Данные для ручного расчета берутся из суммарного рапорта результатов измерений.

• 6.3.3.7. Результаты поверки поп.6.3.3 считаются положительными, если значение относительного СКО выходного сигнала не превышает 7,0 % по площади пика и 1,0 % по времени удерживания.

• 7.1. Результаты поверки считаются положительными, если хромато-масс-спектрометр удовлетворяет требованиям настоящей методике поверки. При поверке заполняется протокол, форма которого приведена в приложении В.

• 7.2. Положительные результаты поверки оформляются путем выдачи свидетельства о поверке по установленной форме. Знак поверки наносится на лицевую панель хроматол-масс-спектрометра.

• 7.3. Результаты поверки считаются отрицательными, если при проведении поверки установлено несоответствие прибора хотя бы одному требованию настоящей методики поверки.

• 7.4. Отрицательные результаты поверки оформляются путем выдачи извещения о непригодности с указанием причин непригодности.

Порядок действий по получению отчета с использованием программы

MassHunter /Qualitative Analysers :

• - Open Data Files (загружаем требуемые сигналы).

• - Smoth-Quadratic/Cubic Savitzky-Golay-11 points (сглаживаем загруженные сигналы)

• - Integrate (MS/MS) (интегрируем загруженный сигнал)

• - Calculate signal-to-Noise-Height-RMSxl-Automatic noise region detection l.OOOmin/O.lmin (рассчитываем отношение сигнал/шум)

• - Configuration-Chromatogram Display Option-Peak labels Retention Time/Area (выводим данные о времени удерживания и площади на экран)

• - вносим данные в сводный отчет Excel.

Методика приготовления поверочных растворов

• 1. Для приготовления поверочного раствора применяют следующее оборудование и реактивы:

• •  Колбы мерные 2-го класса точности с притёртой пробкой по ГОСТ 1770-74.

• •  Пипетки мерные 2-го класса точности по ГОСТ 29228-91.

• •  ГСО 10165-2012 Стандартный образец состава левомицетина.

• •  Метанол кв. «ХЧ» по ТУ 6-09-1709-77.

• •  Вода 1-ой степени очистки по ГОСТ Р 52501-2005.

• •  Весы лабораторные высокой точности по ГОСТ 53228-2008 с максимальной нагрузкой 20 или 200 г;

• 2. Приготовление раствора 10 мг/л (раствор «А»).

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают навеску левомицетина (1,00±0,05) мг, доводят до метки метанолом. Срок хранения 7 дней в холодильнике.

• 3. Приготовление раствора 0,5 пг/мкл.

Раствор «А» с массовой концентрацией 10 мг/л левомицетина используется для приготовления поверочного раствора 0,5 мкг/л (0,5 пг/мм³) методом последовательного объемного разбавления 30% раствором метанола в воде (при необходимости в два этапа). Количество растворителя, необходимое для получения раствора требуемой концентрации, вычисляют используя следующую формулу:

С_Ь=С„,                                  (Б.1)

где Coi -действительное значение концентрации компонента в растворе, используемом в качестве исходного для разбавления мг/дм³.

V_Oi -объем раствора, используемом в качестве исходного для разбавления.

V_K -общий объем приготовленного раствора

Си- расчетная (требуемая) концентрация компонента в контрольном растворе.

• 4. При использовании средств измерений, стандартных образцов и реактивов, указанных в п.1. настоящего приложения, относительная погрешность поверочного раствора, приготовленного по данной методике, не превышает ±5 %.

Приложение В

Хромато-масс-спектромер__________________________

Принадлежит__________________ ИНН___________

ЗАВ.№__________________________________________

Поверка проведена по:

Методике поверки

Средства повер

ки ____________________________________________________________

Условия поверки

Температура окружающего воздуха, °C

Относительная влажность окружающего воздуха

Атмосферное давление, кПа

Внешний осмотр_____________________________________________________

Опробование___________________________________________________________

Проверка соответствия ПО________________________________________________

Определение отношения сигнал/шум

Определение относительного СКО выходного сигнала (Sr)

Результаты расчета относительного СКО выходного сигнала (по площади пика)

Результаты расчета относительного СКО выходного сигнала (по времени удержива-ния)

Поверитель_____________

Дата поверки___________

10

¹

в расчете используется среднеквадратическое значение шума (RMS).