Методика поверки «Хроматографы жидкостные высокоэффективные «Альфахром® М-03»» (ЯПМИ 1544.7.00.00.00.00 И10)

ЯПМИ 1544.2.0.0.00 ИЮ

УТВЕРЖДАЮ

Первый заместитель директора ФГУП ’ЪНИИМС" по науке

МЕТОДИКА ПОВЕРКИ

ЯПМИ 1544.7.00.00.00.00 ИЮ

2017 г.

Настоящая методика поверки (далее - Методика) распространяется на Хроматографы жидкостные высокоэффективные «Альфахром® М-03» (далее - хроматограф), технические требования к которым регламентируются техническими условиями ТУ 9443-001-118231012015, и устанавливает методику их первичной и периодической поверки.

Межповерочный интервал - 1 (один) год.

• 1.1. При проведении поверки должны быть выполнены следующие операции и применены средства поверки с характеристиками, указанными в табл. 1

Таблица 1

• 2.1. При проведении поверки применяют следующие средства поверки:

• - Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72;

• - Нафталин для хроматографии "хч" ТУ6-09-2373-72;

• - Антрацен каменноугольный "чда" ТУ6-09-2283-77;

• - Пирен с содержанием основного вещества не менее 99 %, фирмы Sigma ЕС № 82648;

• - Ацетонитрил для хроматографии "о.с.ч" ТУ 2634-002-04715285-2012;

• - Колонка хроматографическая тестовая 0 2 х 75 мм, заполненная обращено- фазовым сорбентом ProntoSIL 120-5-С18 AQ;

• - Имитатор кюветы ЯПМИ 7.18.07.00.00.00;

• - Пипетка 7-2-10 ГОСТ 20292-74;

• - Колбы 2-100-2,2-250-2 по ГОСТ 1770-74;

• - Стакан СВ-14/8 ГОСТ 25336-82.

Примечания:

• 1. Допускается использование других средств поверки, реактивов и вспомогательного оборудования, метрологические характеристики которых не хуже указанных выше.

• 2. Все средства измерений должны иметь паспорта и действующие свидетельства поверки.

• 3.1.  Конструкция и электрический монтаж хроматографа обеспечивают безопасность обслуживающего персонала в соответствии с ГОСТ 12.2.007.0-75 по классу 1, "Правилами технической эксплуатации электроустановок потребителей" и "Правилами техники безопасности при эксплуатации электроустановок потребителей", "Правилами пожарной безопасности для учреждений, организаций и предприятий Академии наук РФ".

• 3.2.  При проведении поверки соблюдают требования безопасности, изложенные в гл. 7.1 и 7.2 руководства по эксплуатации ЯПМИ 1544.7.00.00.00.00 РЭ (далее "РЭ")

• 3.3.  Помещение, в котором проводится поверка, оборудуют приточно-вытяжной вентиляцией.

• 4.1.  Перед проведением поверки средства поверки должны быть подготовлены к работе в соответствии с эксплуатационной документацией, на хроматографе должны быть выполнены подготовительные работы в соответствии с гл. 8 "Подготовка хромато-рафа к работе" РЭ, приложением 1 к настоящей Методике и эксплуатационной документацией на персональный компьютер.

• 4.2.  При проведении поверки соблюдают следующие условия:

• 1) температура окружающего воздуха (20 ± 2) °C;

• 2) относительная влажность воздуха от 30 % до 80 %;

• 3) атмосферное давление от 84 кПа до 107 кПа;

• 4) напряжение переменного тока, питающего хроматограф 2201“ В;

• 5) частота питающей сети (50 ± 1) Гц.

Примечания:

• 1. Во время проведения поверки колебания температуры не должны превышать ± 2 °C Должно быть обеспечено отсутствие сквозняков и исключена возможность попадания солнечного света на хроматограф.

• 2. Для обеспечения вышеуказанной стабильности напряжения переменного тока, при необходимости, используют стабилизатор напряжения электромагнитный С - 0,5 по ТУ 25-05.1798-75 или стабилизатор с аналогичными характеристиками.

• 5.1. Внешний осмотр

При внешнем осмотре устанавливают:

• 5.1.1.  соответствие хроматографа технической документации в части комплектности;

• 5.1.2. отсутствие дефектов и повреждений, влияющих на работоспособность и приводящих к нарушению требований безопасности, производственной санитарии и охраны окружающей среды;

• 5.1.3. целостность лакокрасочных и гальванических покрытий.

• 5.2. Опробование

При опробовании проверяют режимы работы хроматографа а и режимы детекции.

• 5.2.1. При опробовании проверяют режимы работы хроматографа, режимы детекции. Опробование хроматографа проводят в соответствии с РЭ, «Подготовка к хроматографии. Ручное управление» и «Управление хроматографом. Запуск серии анализов».

При опробовании проверяют общее функционирование хроматографа, возможность перехода из одного режима работы в другой, работу в режиме ручного управления и т.п. В том числе проверяют ручной режим работы - режим подготовка прибора, и режим серийных анализов - выполнение не-скольких последовательных анализов при изократической и градиентной элюции, при различных режимах работы детектора: многоволновом и одноволновом, двухлучевом и однолучевом режимах, а так же режим записи спектра. Проверку герметичности жидкостной системы проводят в ручном режиме как описано в РЭ в главе 12."Герметичность жидкостной системы".

• 5.2.2. Проверка идентификационных данных программного обеспечения.

Совпадение идентификационных данных запущенного ПО с данными, приведенными в таблице 2 является положительным результатом проверки идентификационных данных ПО.

• 5.3. Определение времени выхода на режим, дрейфа нулевого сигнала и уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала детектора хроматографа.

Определение характеристик хроматографа проводят с помощью управляющей программы «АльфаХром».

• 5.3.1. Определение времени выхода на режим, дрейфа нулевого сигнала хроматографа, уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала хроматографа проводят на имитаторе кюветы. Для этого отсоединяют штатную кювету детектора от колонки, вынимают ее и вставляют на ее место имитатор, входящий в комплект поставки.

  • 5.3.1.1  В управляющей программе в окне Управление \ Ручные операции в поле Термостат задают температуру 35 °C и включают его.

  • 5.3.1.2  В окне Настройки хроматографа выставляют следующий режим работы детектора:

• •  метод измерения         - двухлучевой

• •  рабочая кювета          - верхняя

В окне Управление \ Ручные операции в поле Детектор устанавливают:

• • время измерения         - 0,34 с

• • длина волны            - 250 нм

• 5.3.1.3  Включают детектор командой Начать регистрацию и записывают нулевой сигнал в течение 20-30 мин. В окне просмотра устанавливают для оптической плотности шкалу ± 0,001. За время измерения на экране компьютера запись нулевого сигнала выходит на плато (стабильный уровень). Хроматографа и детектор считают вышедшими на рабочий режим.

• 5.3.1.4  По команде Стоп останавливают измерения; данные при этом автоматически записываются в файл с расширением *.detx в папку ... Альфахром'. Детектор. На диаграмме на мониторе компьютера считывают время остановки. Это время будет определять время выхода хроматографа на режим (см. п. 5.3.1.5).

• 5.3.1.5  Время выхода на режим хроматографа должно быть не более 18 мин. Примечание. Здесь и далее, для целей последующего просмотра и обработки экспериментальных файлов, следует записывать полное имя файла, присутствующее в основном окне на экране во время работы детектора.

• 5.3.2. Повторно запускают детектор на запись нулевого сигнала в течение 0,5 часа. Останавливают детектор, в программе "АльфаХром" загружают (открывают) полученный файл *.detx из папки .. А Альфахром\Детектор и экспортируют его в формат *.det (Файл\ Экспорт\ Хроматограмму в файл формат *.chr).

• 5.3.3. Загружают полученный файл *.det из папки ...\ Альфахром\ Детектор в обрабатывающую программу МетроС. Работа программы МетроС описана в п. 5.5. Вычисление шума и дрейфа детектора проводится одновременно по пункту

• 5.3.1.

• 5.3.3.1.  Дрейф рассчитывается как одностороннее смещение нулевого сигнала за 1 час работы в единицах оптической плотности в час (далее - е.о.п./ч) по формуле

5t = 0,153^cM,                                   (1)

где 0,153 - безразмерный коэффициент пересчета оптической плотности на реальную кювету хроматографа «Альфахром М-03»;

Асм - одностороннее смещение нулевого сигнала за 1 ч, е.о.п.

• 5.3.3.2.  Дрейф нулевого сигнала хроматографа должен быть не более 540-5 е.о.п./ч на имитаторе кюветы.

• 5.3.3.3.  Уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала в единицах оптической плотности рассчитывают по формуле:

Дх ⁼ 0,153‘Лтах,                                     (2)

где 0,153 - безразмерный коэффициент пересчета оптической плотности на реальную кювету хроматографа «Альфахром М-03»;

4тах - максимальная амплитуда нулевого сигнала, е.о.п.

• 5.3.3.4. Уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала хроматографа не должен превышать 140-4 е.о.п.

• •  подготавливают элюент (дегазируют) одним из методов, описанных в РЭ в гл. 8.2 "Подготовка элюентов и жидкостной системы", или подключают на выход кюветы клапан противодавления;

• •  устанавливают кювету детектора, запускают регенерацию колонки, как описано в РЭ в гл. 8.4 "Ежедневная процедура подготовки хроматографа";

• •  проверяют отсутствие воздушных пузырьков в жидкостной системе, как это описано в РЭ в гл. 12.2 "Воздушные пузырьки в жидкостной системе";

• готовят контрольный раствор № 1 (Тестовая смесь "Тест-3") в соответствии с методикой, приведенной в приложении 1.

• 5.4. Определение метрологических характеристик хроматографа

Все последующие операции выполняют после выхода хроматографа на режим (по п. 5.3.1).

• 5.4.1. Определение относительного среднеквадратического отклонения (СКО) выходного сигнала хроматографа (площади пика) в изократическом режиме

• 5.4.1.1.  С помощью пипетки набирают в две пробирки по 100 мкл контрольного раствора №1 (Приложение 1), плотно закрывают их пробками. Устанавливают пробирки в гнезда 1 и 2 автодозатора.

• 5.4.1.2.  Со страницы Настройка/ Настройки хроматографа устанавливают сле

дующие параметры анализа:

элюенты А и Б         - ацетонитрил

контроль давления - мин. 0,2 МПа макс. 8,0 МПа

• промывка иглы         -выкл.

• •  промывка инжектора    -вкл.

• •  рабочая кювета         - верхняя

• •  использовать один метод для всей серии анализов.

5.4.1.3.  Со страницы Управление/ Серия анализов устанавливают следующие

параметры:

требуемая температура -35°С

скорость потока при регенерации -100 мкл/мин скорость потока при элюции -100 мкл/мин

• - от 1 до 12

-1,1,1,1, 1,1,2, 2,2,2,2,2

• - 5 мкл

• - не использовать

Примечание. Указанные параметры могут быть записаны в файл метода Поверка.пРс1, который можно использовать при всех последующих процедурах поверки хроматографа.

• 5.4.1.4.  Запускают выполнение серии из 12 анализов по команде Начать анализ. Хроматограф автоматически выполнит серию из 12 хроматограмм, данные автоматически запишутся в файлы с расширением *chrx в папку Алъ-фахром\Анализы\ Поверка \DATE (гггг-мм-дд).

• 5.4.1.5.  В программе "Альфахром" открывают 10 из 12 полученных файлов *.chrx с номерами 2-6и8-12и экспортируют их в формат *.chr (Файл\ Экспорт\ Хроматограмму в файл формата *.chr).

• 5.4.1.6.  Открывают полученные файлы *.chr из папки Алъфахром\ А нал изы\ Поверка \DATE в программе МетроС. Проводят математическую обработку десяти хроматограмм серии. Процедура расчета описана в п. 5.5.

• 5.4.1.7.   Относительное СКО выходного сигнала (v_cp) в процентах рассчитывается по формулам:

  

  п

  

• (3)

• (4)

где п - число хроматограмм;

Ajt - площадь/-ого пика z-ой хроматограммы, е.о.п.-мкл;

Д/ср - среднее арифметическое значение площади /-ого пика из десяти хроматограмм, е.о.п.-мкл;

vj - относительное СКО площади /-ого пика.

Результат рассчитывается автоматически по программе МетроС после считывания файлов с расширением *.chr.

• 5.4.1.8. Относительное СКО выходного сигнала должно быть не более 1,0 %.

• 5.4.2. Определение относительного СКО выходного сигнала хроматографа (времен удерживания) в изократическом режиме

• 5.4.2.1. Относительное СКО времен удерживания Т_ср рассчитывается из тех же экспериментальных данных, что и СКО выходного сигнала по площади пика, по формулам:

  
  

(5)

(6)

где п - число хроматограмм;

Tjt - время удерживания /-ого пика для z-ой хроматограммы;

Tjcp - среднее время удерживания /-ого пика по всем хроматограммам; Tj - относительное СКО времени удерживания для /-ого пика, %.

Результат рассчитывается автоматически по программе МетроС после считывания файлов с расширением *.chr.

• 5.4.2.2. Относительное СКО времен удерживания должно быть не более 1,0 %.

5.4.3. Определение изменения выходного сигнала (площади пика) через 8 ч

• 5.4.3.1. Обеспечивают непрерывную работу хроматографа в течение 8 ч (рабочего дня).

• 5.4.3.2.  По истечении 8 часов ставят 2 новые пробирки с контрольным раствором № 1 в позиции 1 и 2 автодозатора. Повторяют эксперимент и обработку результатов по п. 5.4.1.

• 5.4.3.3. Рассчитывают относительное изменение выходного сигнала (площадь пика) за 8 ч непрерывной работы по формуле:

8_S= 100 • (A(t)_cp - AcpJ/Acp                                 (7)

где A(t)_cp - сумма средних арифметических значений площадей трех пиков серии, полученной в конце испытаний, е.о.п.-мкл.;

Аср - сумма средних арифметических значений площадей трех пиков серии, полученной в начале испытаний, е.о.п. -мкл;

S_s - относительное изменение выходного сигнала (площадь пика) за 8 ч непрерывной работы, %.

Значения A(t)_cp и Ас_Р считывают из результатов расчетов по программе МетроС в ячейке таблицы на пересечении строки Среднее и столбца Сигнал.

• 5.4.3.4. Изменение выходного сигнала хроматографа (сумма площадей трех пиков) за 8 ч непрерывной работы не должно выходить за пределы ± 3 %.

• 5.4.4. Определение изменения времен удерживания пиков через 8 ч производится по результатам, полученным при выполнении п. 5.4.3

• 5.4.4.1. Рассчитывают относительное изменение времен удерживания пиков за 8 ч непрерывной работы по формуле:

  

где T(t)₃,cp - среднее арифметическое значение времен удерживания пика № 3 (антрацена) в серии, полученной в конце испытаний, мин.;

Тз,_ср - среднее арифметическое значение времен удерживания пика № 3 в серии, полученной в начале испытаний, мин.;

8t - относительное изменение времени удерживания за 8 ч непрерывной работы, %.

Значения Т(()з,с_Р и Тз,_ср считывают из результатов расчетов по программе МетроС в ячейке таблицы на пересечении строки 3 и столбца Т_ср, мин.

• 5.4.4.2. Изменение времени удерживания пиков за 8 ч непрерывной работы не должно выходить за пределы ± 3 %.

5.5. Процедура вычисления результатов по программе МетроС. Описание работы программы МетроС приведено в Приложении 2.

• 5.5.1. Входят в программу МетроС двойным щелчком кнопки мыши по иконке, соответствующей этой программе.

• 5.5.2. По команде Выберите хроматограммы для расчета выбирают папку Аль-фахром\ Детектор. Выбирают нужный файл детектора с расширением *.det, нажимают кнопку Открыть.

• 5.5.3. Повторно задают команду Выберите хроматограммы для расчета, выбирают директорию с файлами хроматограмм Альфахром\ Анализы ХПоверкаХБАТЕ. Удерживая клавишу Ctrl, мышкой помечают выбранные файлы, нажимают кнопку Открыть.

• 5.5.4. Выбирают команду Расчет метрологических характеристик. Расчет произве-дется автоматически.

• 5.5.5. Выводят на принтер отчет нажатием кнопки с изображением принтера.

• 5.5.6. Результаты для дрейфа нулевого сигнала детектора, шума детектора, СКО выходного сигнала (площадь пика), СКО времен удерживания пиков содержатся в соответствующих разделах отчета.

• 6.1. Результаты поверки Хроматографа жидкостного высокоэффективного «Аль-фахром® М-03» заносят в протокол (Приложение 3).

• 6.2.  Положительные результаты поверки хроматографов оформляют выдачей свидетельства установленной формы.

• 6.3.  При отрицательных результатах поверки оформляют извещение установленной формы о непригодности, прибор бракуют, к дальнейшей эксплуатации не допускают и направляют в ремонт. После ремонта прибор подвергают повторной проверке.

  Начальник лаборатории 009 ФГУП «ВНИИМС»

  
  

Приложение 1

• 1.1   При приготовлении контрольных растворов массовая концентрация вещества (Q определяют по формуле:

С - N-m/V,

где N - массовая доля основного вещества (в долях единицы);

т - масса вещества, г;

V - объем раствора, см³ (мл).

• 1.2   Погрешность приготовления контрольного раствора определяется погрешностью, обусловленной наличием примесей в препарате, погрешностью взвешивания, погрешностью используемой мерной посуды.

Предел допускаемой погрешности аналитических весов составляет 0,2 мг. Относительная погрешность определения массы вещества (Зт) определяяют по формуле:

Зт = ±Лщ/т,                                                         (1)

где А_т - допускаемая погрешность взвешивания, мг; т - навеска вещества, мг.

Допускаемая погрешность взвешивания для двух измерений (пустого стаканчика и стаканчика с навеской):

А_т =V0,22 + 0,22 = 0,28 мг

Относительная погрешность используемой мерной посуды (Зу) определяяют по формуле:

Зу= + Ay/V,                                                             (2)

где Ау - допускаемая погрешность от номинальной вместимости мерной посуды, см³ (мл);

V - объем используемого раствора, см³ (мл).

Относительная погрешность определения массовой доли основного вещества (3n) в препарате определяют по формуле:

8n - ± AnIN ,                                                             (3)

где An - допускаемая погрешность, обусловленная содержанием примесей в основном веществе, %;

N - массовая доля основного вещества в препарате, %.

• 1.3      Погрешность приготовления контрольных растворов (<5) в процентах определяют по формуле:

£=±100-Н З^ + М + Зу* ,                                  (4)

где к - коэффициент, равный 1,1 при доверительной вероятности 0,95.

• 2.1   Для приготовления контрольного раствора № 1 используют нафталин для хроматографии "хч", антрацен каменноугольный "чда", пирен "для синтеза", ацетонитрил "осч" для жидкостной хроматографии.

  • 2.1.1. На аналитических весах в стаканчике СВ-14/8 (далее по тексту - стаканчик) взвешивают 145 мг нафталина. Навеску переносят в колбу 2-250-2.

  • 2.1.2. Аналогично взвешивают 50 мг пирена, навеску переносят в ту же колбу.

  • 2.1.3. Взвешивают 30 мг антрацена. Навеску переносят в колбу 2-100-2. Приливают в колбу ацетонитрил (приблизительно 2/3 от необходимого объема), перемешивают до полного растворения осадка. Доводят объем раствора до метки ацетонитрилом, перемешивают.

  • 2.1.4. Затем из колбы 2-100-2 отбирают пипеткой 7-2-10 10 см³ (10 мл) раствора и переносят в колбу 2-250-2 (где уже имеются нафталин и пирен), приливают ацетонитрил (приблизительно до 2/3 от необходимого объема), перемешивают до полного растворения осадка. Доводят объем раствора до метки ацетонитрилом, перемешивают.

• 2.2  Относительную погрешность определения массы нафталина при взвешивании 8m^Np определяют по формуле (1):

Sm^NP = ± 0,28/145 = ± 0,002

• 2.2.1. Относительную погрешность определения массовой доли основного вещества для нафталина в препарате определяют по формуле (3):

5}№ = ±0,1/99,9 = ±0,001

• 2.2.2. Суммарная относительная погрешность для массы нафталина в контрольном растворе (фр) равна:

3n_p = ± л/ (Vo² + (V^p)² = ±^0,0022+ 0,0012 = ±0,002

• 2.3  Относительную погрешность определения массы пирена при взвешивании (QmPy) определяют по формуле (1):

V = ± 0,28/50 = ± 0,006

• 2.3.1. Относительную погрешность определения массовой доли основного вещества для пирена (фЛ) в препарате определяют по формуле (3):

5_N^Py = ± 2/98 = ± 0,020

• 2.3.2. Суммарная относительная погрешность для массы пирена в контрольном растворе (фу) равна:

8р_у = ± V (V)² + (V)² = ± ^0,0062+ 0,0202 = ±0,021

• 2.4  Относительную погрешность определения массы антрацена при взвешивании V” определяют по формуле (1):

V” = ± 0,28/30 = ± 0,009

• 2.4.1. Относительную погрешность определения массовой доли основного вещества для антрацена (V”) в препарате определяют по формуле (3):

8^^п = ± 2/98 = ± 0,020

• 2.4.2. Относительную погрешность используемой мерной посуды при введении антрацена в контрольный раствор № 1 (£/”) определяют по формуле (2).

• 2.5  Допускаемая погрешность от номинальной вместимости для колбы 2-100-2 составляет ±0,2 см³ (±0,2 мл), для пипетки 7-2-10 составляет ±0,1 см³ (±0,1 мл).

8/^п = ± (0,2/100 + 01/10) = ± 0,012

• 2.6  Суммарная относительная погрешность для массы антрацена в контрольном растворе № 1 (<^«) равна:

8ап = ± л/(^")²+(й/")²+ (£/^и)² = ± ^0,0092+0,0202+0,0122 = ± 0,025

• 2.7  Относительную погрешность используемой мерной посуды при приготовлении контрольного раствора № 1 определяют по формуле (2).

  • 2.7.1. Допускаемая погрешность от номинальной вместимости для колбы 2-250-2 составляет ± 0,3 см³ (± 0,3 мл).

^Г=± 0,3/250 = ± 0,0012

• 2.8  Погрешность приготовления контрольного раствора № 1 в процентах определяют по формуле (4) и она равна:

8=± 1,1 100- ^8_Np²+8p_y²+8An+8^ = ± 1,1 100- д/0,0022+0,0212+0.0252+0.0012 = ±3,6

Таким образом, погрешность приготовления контрольного раствора № 1 составляет ± 3,6 %.

• 3.1  Контрольный раствор №2 готовят двойным разбавлением раствора антрацена

0,3 мг/мл, используемого при приготовлении контрольного раствора № 1.

• 3.1.1. Из колбы 2-100-2, содержащей раствор антрацена в ацетонитриле, отбирают пипеткой 4-2-1 1 см³ (1 мл) раствора и переносят в колбу 2-250-2, заполняют ее до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают.

• 3.1.2. Затем из колбы 2-250-2 отбирают пипеткой 4-2-1 1 см³ (1 мл) раствора и переносят в колбу 2-100-2, заполняют ее до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают.

• 3.2  Относительную погрешность определения массы антрацена при взвешивании (8т^Ап) определяют по формуле (1):

8т^Ап = ± 0,28/30 = ± 0,009

• 3.3  Относительную погрешность определения массовой доли основного вещества для антрацена ($/”) в препарате определяют по формуле (3):

8/^п = ± 2/98 = ± 0,020

• 3.4  Относительную погрешность используемой мерной посуды 8v при приготовлении контрольного раствора № 2 определяют по формуле (2).

• 3.5  Допускаемая погрешность от номинальной вместимости для колбы 2-1000-2 составляет ± 0,2 см³ (± 0,2 мл), для колбы 2-250-2 составляет ± 0,3 см³ (± 0,3 мл), для пипетки 7-2-10 ± 0,1 см³ (± 0,1 мл), для пипетки 4-2-1 ± 0,01 см³ (± 0,01 мл).

8у = ± (0,3/250+2 ■ 0,2/1000+0,1/10+2 0,01/1)= ± 0,033

• 3.6  Погрешность приготовления контрольного раствора №2 в процентах определяют по формуле (4) и равна:

8= ± 1,1 • 100- ^0,0092 +0,0202 +0.0332 = ± 4,0

Таким образом, погрешность приготовления контрольного раствора № 2 составляет ± 4,0 %.

• 4.1   Приготовление контрольных растворов должно осуществляться лицами, аттестованными на право приготовления контрольных растворов, с обязательной записью в "Журнале приготовления контрольных растворов".

• 4.2  Контрольные растворы хранятся в стеклянной посуде из темного стекла при комнатной температуре не более одного года.

ПРИМЕЧАНИЕ. Аттестованный контрольный раствор № 1 (Тестовая смесь "Тест-3") продается производителем хроматографов.

Приложение 2

КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ ПРОГРАММЫ МЕТРОЛОГИЧЕСКИХ РАСЧЕТОВ "МетроС"

Программа метрологических расчетов "МетроС" входит в пакет дополнительного программного обеспечения хроматографа «Альфахром М-03».

Программа "МетроС" обеспечивает расчеты основных нормируемых метрологических параметров хроматографа «Альфахром М-03»: величин флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала детектора, среднеквадратического отклонения (СКО) времен удерживания пиков и выходного сигнала (площади пика) в соответствии с методикой поверки ЯПМИ 1544.7.00.00.00.00 ИЮ с выдачей печатного отчета.

Для расчета параметров необходимо выполнить все подготовительные работы и провести хроматографические эксперименты в соответствии с упомянутой методикой.

Примерный вид хроматограмм, файла детектора и печатного отчета приведены в данном приложении.

Программа функционирует в операционной среде

При вызове программы на экране появляется диалоговое окно, изображенное на рис. 1. Кнопки с пиктограммами в левой части окна обеспечивают все управление работой программы; для удобства работы они снабжены всплывающими подсказками.

Дрейф, е.о.п./ч=0,00001540±0,00000112

Статус: В коме!

Рис.1. Основное диалоговое окно программы "МетроС"

При подведении указателя мыши к первой кнопке возникнет подсказка "Выберите хроматограммы для расчета", а при щелчке - откроется стандартное диалоговое окно (рис. 2) для выбора хроматограмм, которые будут участвовать в расчете СКО, и файла детектора, на основании которого будут выполнены расчеты величин шума и дрейфа детектора.

*] 12-09-53.002.chr

1*'112-32-25.006.chr

l»j 12-43-41.00e.chr

i^’112-54-57 OlO.chr______________

nil Tm: Файл 'CUR'

Изменен: 22.04.2015 11:42

I Размер: 14,3 КБ

тектора.

Рис.2. Диалоговое окно выбора хроматограмм и файла

детектора

При нажатии на кнопку, изображенную слева, автоматически будут выполнены все расчеты, и результат расчетов будет отражен в основном окне справа.

Программа рассчитана только на обработку таких хроматограмм, которые выполнены в соответствии с методикой поверки, и площади пиков которых не отличаются от среднестатистических для этой системы более чем на 5 процентов.

В случае неудачных хроматографических экспериментов или при ошибочном выборе хроматограмм на экране возникнет окно предупреждения с надписью "В хроматограмме не найден пик для расчета :.... Хроматограмма исключена из расчета". С этим можно только согласиться, нажав ОК, и получить результат по оставшимся хроматограммам, либо добавить дополнительные хроматограммы и повторить расчет.

Ц При нажатии на кнопку с нарисованным принтером открывается окно предварили^! I тельного просмотра печатного отчета. Форма отчета жестко задана и не может ■мим быть изменена. В нем предусмотрено отражение всех данных хроматографических экспериментов (колонка, проба, режим детектора, режим элюции, имена файлов и пр.) и собственно результатов расчетов с соответствующими заключениями: "Тест СКО ..... ПРОШЕЛ" или "Тест СКО.....НЕ ПРОШЕЛ". Заключение о том, что тест прошел либо не прошел, делается на основании соответствующих критериев, записанных в методике поверки и в ТУ на хроматограф «Альфахром М-03».

Отчет может быть записан в файл. Файл записывается в txt-формате в ту же папку, где находятся хроматограммы, и впоследствии он может быть вставлен в текстовый или графический редактор.

I I I . I

1--------------1--------------1--------------1--------------1--------------1--------------1--------------1--------------1--------------f

1            2           3           4           5

Время, мт

Примерный вид записи шума и дрейфа детектора.

Допускается наличие случайного выброса - не более одного за период записи.

• 5        10       15       20       25

Время, мин.

ОТЧЕТ О ПРОВЕРКЕ ХРОМАТОГРАФА

Определение CKO согнала (площадей паков) а СКО времен удерживания Дата

Оператор      Головина

№ анализа

S мкл       № пробирок 2,1,1,1,1,1,2,2,2,2

ProntoSil-120-5-C18 AQ, N=3717, D(ram)=2, L(mm)=75, dP(um)=5 35°C

Длина волны: 250 нм. Нижняя кювета

Метод измерения    Одно-лучевой

А                ацетонитрил

Б                ацетонитрил

Макс, давление, МПа: 0,8

Условия проведения экспериментов - в соответствии с инструкцией по эксплуатации

Результаты расчетов:

Легенда: т - среднее время удерживания пика

СКО(Т) - относительное СКО времен удерживания Сигнал - средняя площадь пиков

СКО(сигнал) - относительное CKD площадей пиков

Сумма:                    146,95

Среднее:           0,376                0,559

Условии прохождения теста: CKO (Т) <1%, СКО (5) <1% Использовано файлов 10

D:\А1рЬаСЬгат\Анализы\СК0\13-0б-13_012.chr D: \А1рЬаСЬгат\Анализы\СК0\12-09-53_002. chr О:\А1рЬаСЬгат\Анализы\СК0\12-15-31_003.chr О:\А1рЬаСЬгаш\Анализы\СК0\12-21-09_004.chr D: \А1рЬаСЬгшп\Анализы\СК0\12-26-47_005. chr D:\А1рЬаСЬгот\Анализы\СК0\12-32-25_006.chr D:\А1.р11аСЬгот\Анализы\СК0\12-43-41_008.chr О: \А1рЬаСЬгот\Аналмвы\СК0\12-49-19_009. chr D:\А1рЬаСЬгат\Днализы\СК0\12-54-57_010.chr D:\А1рЬаСЬгот\Анализы\СК0\13-00-35_011.chr

Результаты проверки:

Тест на СКО площадей пиков пройден успешно!

Тест на СКО времен удерживания пиков пройден успешно!

Хроматограф ГОТОВ к использовании!

Подпись оператора______________________________ дата ______________

Подпись ответственного_____________________________ дата ______________

Приложение 3 ПРОТОКОЛ №___

Хроматограф жидкостный высокоэффективный «Альфахром® М-03»

Тип прибора: хроматограф «Альфахром М-03»

Заводской №________

Детектор: УФ-спектрофотометр, № детектора_______

Вид поверки: первичная / периодическая

Принадлежит:_________________________________________________________

(наименование организации)

Условия поверки: температура окружающего воздуха__°C, атм. давление_______кПа,

относительная влажность воздуха_____%

Средства поверки: Контрольный раствор №1 (Тестовая смесь "Тест-3"); Объем пробы 5 мкл;

Режимы поверки: в соответствии с методикой поверки ЯПМИ 1544.7.00.00.00.00 ИЮ

Результаты поверки:

• 1.   Внешний осмотр: соответствует требованиям

• 2.   Опробование: пригоден к применению

• 3.   Определение параметров детектора: _______

  Наименование параметра	Единицы измерения	Значение параметра
  		Действительное	Допустимое
  Время выхода на режим	ч		0,5
  Уровень флуктуационных шумов	е.о.п.		1,0 *10'4
  Дрейф нулевого сигнала	е.о.п./ч		5 *10’5

4. Определение метрологических характеристик.

4.1. Определение среднего квадратического отклонения выходного сигнала

4.2. Определение изменения выходного сигнала за 8 часов непрерывной работы

По результатам поверки прибор признан пригодным / непригодным к применению.

(ненужное зачеркнуть)

Выдано свидетельство / извещение о непригодности / № _______

(ненужное зачеркнуть)

Поверку провел______________________________ ________________

Фамилия И.О.               Подпись

Отв. исполнитель _____________________________ ________________

Фамилия И.О.               Подпись

18