Методика поверки «ГСИ. Анализатор иммуноферментный автоматический EVOLIS Twin Plus » (МП 045.Д4-19)

УТВЕРЖДАЮ

___Филимонов И.С.

» октября 2019 г

ФГУП «ВНИИОФИ»

Государственная система обеспечения единства измерений

Анализатор иммуноферментный автоматический EVOLIS Twin Plus МЕТОДИКА ПОВЕРКИ

МП 045.Д4-19

Главный метролог

Него да С.Н.

«ВНИИОФИ»

Главный научный сотрудник ФГУП «ВНИИОФИ»

Крутиков В.Н.

« /У » октября 2019 г

Москва

2019 г

Настоящая методика поверки распространяется на анализатор иммуноферментный автоматический EVOLIS Twin Plus (далее - анализатор), изготовитель Bio-Rad, Франция, серийный №: 6220000684.

Анализатор предназначен для измерений оптической плотности и дозирования жидкостей при выполнении работ по оценке соответствия продукции ООО «Нанолек».

Также, в анализаторе имеется функция нагрева образца (инкубирование).

Настоящая методика поверки устанавливает порядок, методы и средства проведения его первичной и периодических поверок.

Интервал между поверками - 1 год.

• 1.1 Поверку анализатора осуществляют аккредитованные в установленном порядке в области обеспечения единства измерений юридические лица и индивидуальные предприниматели.

• 1.2 При проведении поверки должны быть выполнены операции, перечисленные в таблице 1.

Таблица 1 - Операции поверки

• 1.3 Допускается проведение поверки для меньшего числа измеряемых величин и для меньшего числа поддиапазонов.

• 1.4 При получение отрицательных результатов, при проведении той или иной операции, поверка прекращается.

• 2.1 При проведении поверки должны применяться средства, указанные в таблице 2.

аблица 2 - Средства поверки анализатора

2.2 Допускается применение других средств, не приведенных в таблице 2, но обеспечивающих определение метрологических характеристик поверяемого средства измерений с требуемой точностью.

• 2.3 Средства измерений, указанные в таблице 2, должны быть поверены и аттестованы в установленном порядке.

• 3.1 К проведению поверки допускаются лица:

• - прошедшие обучение на право проведения поверки в области лабораторной медицины;

• - изучившие настоящую методику поверки и эксплуатационную документацию на анализатор;

• - соблюдающие требования, установленные правилами по охране труда при эксплуатации электроустановок, согласно приказу Министерства труда и социальной защиты

№ 328Н от 24.07.13г.

• 3.2 При проведении поверки должны быть соблюдены требования безопасности, приведенные в руководстве по эксплуатации анализатора.

4 Условия поверки

4.1 При проведении поверки должны соблюдаться климатические следующие условия:

Перед началом работы анализатор необходимо выдержать при данных условиях не менее часа.

4.2 При проведении поверки анализатор необходимо предохранять от следующих воздействий:

• - потоков воздуха от вентиляционных отверстий или кондиционера/нагревателя;

• - прямых солнечных лучей.

• 4.3 Поверка анализатора проводится в присутствии сотрудника лаборатории/ сотрудника отдела главного метролога ООО «Нанолек».

• 4.4 Все операции настоящей методики поверки проводятся в соответствии с требованиями технической документации (руководство по эксплуатации, паспорт и проч.) на анализатор и на каждое средство поверки.

• 5.1 Подготовить средства поверки к измерениям на анализаторе:

• - комплект светофильтров поверочный КСП-02 (далее - комплект) в соответствии с руководством по эксплуатации на него; при проведении поверки анализатора используются светофильтры №№: 1, 3 - 4, 6 - 8, 16 - 17 из комплекта;

• - весы неавтоматического действия GH-252 (далее - весы) в соответствии с руководством по эксплуатации на них;

• - комплекс измерительный iBDL ревизор iBDLR-3-U-X (далее - комплекс iBDL) в соответствии с руководством по эксплуатации на него;

• - секундомер электронный Интеграл С-01 (далее - секундомер) в соответствии с руководством по эксплуатации на него;

• - вода дистиллированная и планшеты должны находиться при комнатной температуре не менее двух часов перед измерениями.

• 5.2 Подготовить анализатор к проведению поверки в соответствии с руководством по эксплуатации на него и приложением В к настоящей методике поверки.

• 6 Проведение поверки

• 6.1.1 При проведении внешнего осмотра должно быть установлено соответствие анализатора следующим требованиям:

• - отсутствие механических повреждений корпуса анализатора и элементов управления;

• - наличие маркировки на анализаторе с ясным указанием типа, производителя и серийного номера.

• 6.1.2 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если:

• - на корпусе анализатора отсутствуют механические повреждения;

• - маркировка анализатора содержит сведения о типе, производителе и серийном номере.

• 6.2.1 Провести опробование анализатора:

• - на рабочем столе ПК двойным кликом мыши запустить управляющую программы анализатора «2PS»;

• - войти в главное меню управляющей программы.

• 6.2.2 Проверка функции нагрева образца:

• - разместить регистраторы комплекса iBDL в анализаторе;

• - через управляющую программу задать анализатору температуру в инкубаторе

37 °C;

• - запустить процесс нагрева образца (инкубирование) одновременно с пуском секундомера;

• - на 20-ой минуте зафиксировать показание температуры в инкубаторе, отраженной на экране ПК;

• - остановить инкубирование образца; выключить секундомер; извлечь регистраторы комплекса измерительного iBDL из анализатора.

• 6.2.3 Проверка версии ПО:

• - в главном меню управляющей программы «2PS» последовательно выбрать: «Помощь» —* «о программе 2PS».

• 6.2.4 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если на мониторе ПК отразилось:

• - главное меню управляющей программы анализатора; процесс прошел без обозначения ошибок;

• - температура в инкубаторе анализатора находится в пределах (37 ± 1) °C на 20-ой минуте инкубирования; допускается проверка функции нагрева образца (инкубирование) при другом значении температуры, согласованным с сотрудником лаборатории пользователя;

• - версия ПО соответствует таблице 2 настоящей методики поверки.

Таблица 2 - Идентификационные данные (признаки) анализатора

• 6.3 Определение (контроль) метрологических характеристик

• 6.3.1.1 Проверку диапазона измерений оптической плотности совмещают с операцией определения абсолютной систематической погрешности измерений оптической плотности.

• 6.3.1.2 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если диапазон измерений оптической плотности составляет от 0,03 до 3,00 Б.

• 6.3.2.1 В соответствии с приложением Б настоящей методики поверки провести по пять измерений оптической плотности светофильтров №№: 1, 3 — 4, 6 — 8, 16 — 17 из комплекта на длинах волн: 405, 450, 492, 620 нм (количество длин волн обсуждается с пользователем).

• 6.3.2.2 Рассчитать среднее арифметическое значение оптической плотности, D_cp, Б, для каждого светофильтра на каждой длине волны по формуле

  n=5

  

(1)

где Д - измеренное значение оптической плотности, Б, анализатором.

• 6.3.2.3 Рассчитать абсолютную систематическую погрешность измерений оптической плотности, Д£)_ь Б, для каждого светофильтра на каждой длине волны по формуле

AD₍=D_ep-D_A                        (2)

где D_j3 - значение оптической плотности светофильтра, Б, на длине волны из действующего свидетельства о поверке комплекта.

• 6.3.2.4 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если абсолютная систематическая погрешность измерений оптической плотности в диапазоне измерений оптической плотности от 0,03 до 0,30 Б включительно находится в пределах ± 0,005 Б.

• 6.3.3.1 Рассчитать относительную систематическую погрешность измерений оптической плотности &Do_h %, для каждого светофильтра на каждой длине волны по формуле

А£>₀, =           -100,                             (3)

• 6.3.3.2 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если относительная систематическая погрешность измерений оптической плотности в диапазоне измерений оптической плотности свыше 0,30 до 3,00 Б находится в пределах ± 2,5 %.

• 6.3.4.1 Рассчитать абсолютное среднее квадратическое отклонение измерений оптической плотности Бабе, Б, для каждого светофильтра на каждой длине волны по формуле

  
  

  (4)

• 6.3.4.2 Рассчитать относительное среднее квадратическое отклонение измерений оптической плотности S_omH, %, для каждого светофильтра на каждой длине волны по формуле

^„=^■100, (5)

• 6.3.4.3 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если относительное среднее квадратическое отклонение измерений оптической плотности не более 1,0 %.

• 6.3.5.1 Поочередно и пятикратно задать анализатору объём дозирования жидкостей: 20, 100, 200 мкл.

• 6.3.5.2 Рассчитать значение объёма дозирования жидкостей Кд, мкл, одной лунки каждого 96-луночного планшета для ИФА-анализа для каждого объема дозирования жидкостей по формуле

_г          .юоо                            (6)

96- р

где т₃ - масса заполненной дистиллированной водой планшеты, г (см. п. В.4.4 приложения В настоящей методики поверки);

т_п - масса пустой планшеты, г (см. п. В.4.2 приложения В настоящей методики поверки);

р- плотность дистиллированной воды при текущих значениях температуры, г/см’’ (см. приложение Б настоящей методики поверки).

• 6.3.5.3 Рассчитать среднее арифметическое значение объёма дозирования жидкостей Ид_Ср, мкл, для каждого объема дозирования жидкостей по формуле

(7)

• 6.3.5.4 Определить относительную систематическую погрешность дозирования

AV_Oj, %, для каждого объема дозирования жидкостей по формуле

АГ₀,=^~^Гд 100,                      ₍₈₎

*д

• 6.3.5.5 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если относительная систематическая погрешность дозирования не превышает:

10 % для объёма дозирования жидкостей 20 мкл;

5 % для объёма дозирования жидкостей 100 мкл;

5 % для объёма дозирования жидкостей 200 мкл.

• 6.3.6.1 Рассчитать абсолютное среднее квадратическое отклонение дозирования жидкостей, Aj, мкл, для каждого объема дозирования по формуле

  

  5

(9)

• 6.3.6.2 Рассчитать относительное среднее квадратическое отклонение дозирования жидкостей, Aoi, %, для каждого объема дозирования по формуле

• ^V Дер

• 6.3.6.3 Анализатор считают прошедшим операцию поверки, если относительное среднее квадратическое отклонение дозирования жидкостей не превышает:

10 % для объёма дозирования 20 мкл;

5 % для объёма дозирования 100 мкл;

5 % для объёма дозирования 200 мкл.

• 7.1 Результаты поверки анализатора заносятся в протокол поверки, который хранится в организации, проводившей поверку (см. приложение А к настоящей методике поверки).

• 7.2 Если анализатор прошел поверку с положительным результатом, он признается годным и допускается к применению.

  • 7.2.1 Результаты поверки оформляются свидетельством о поверке; наносится знак поверки в соответствии с требованиями Приказа Минпромторга России от 02.07.2015

№ 1815 (в ред. Приказа Минпромторга России от 28.12.2018 № 5329) «Об утверждении Порядка проведения поверки средств измерений, требования к знаку поверки и содержанию свидетельства о поверке».

• 7.2.2 Знак поверки наносится на свидетельство о поверке анализатора.

• 7.3 Если анализатор прошел поверку с отрицательным результатом, он признается непригодным, не допускается к применению; на него выдаётся извещение о непригодности в соответствии с требованиями Приказа Минпромторга России от 02.07.2015 № 1815 (в ред. Приказа Минпромторга России от 28.12.2018 № 5329) «Об утверждении Порядка проведения поверки средств измерений, требования к знаку поверки и содержанию свидетельства о поверке».

Начальник отдела Д-4

( должность)

Начальник сектора МО СИМН отдела Д-4 (до пкность)

Ведущий инженер отдела Д-4

(должность)

ПРИЛОЖЕНИЕ А

(рекомендуемое) к методике поверки МП 045.Д4-19 анализатора иммуноферментного автоматического EVOLIS Twin Plus серийный №: 6220000684

ПРОТОКОЛ ПЕРВИЧНОЙ/ПЕРИОДИЧЕСКОЙ ПОВЕРКИ

Средство измерений: Анализатор иммуноферментный автоматический EVOLIS Twin Plus Заводской номер:______6220000684__________________________________________________

Владелец СИ:   ____________________________________________________________

ИНН владельца СИ:

Применяемые

эталоны:   _____________________________________________________________________

Применяемая         МП 045.Д4-19

методика поверки______«ГСП. Анализатор иммуноферментный автоматический EVOLIS Twin Plus»

Условия поверки:

Проведение поверки:_____________________________________________________________

А.1 Внешний осмотр__________________________________________________________

А.2 Опробование анализатора, проверка функции нагрева образца (инкубирование).

Проверка версии программного обеспечения_______________________________________

А.З Проверка диапазона измерений оптической плотности. Определение абсолютной и относительной систематической погрешности измерений оптической плотности, относительного СКО измерений оптической плотности______________________________

А.4 Проверка объема дозирования жидкостей. Определение относительной систематической погрешности дозирования жидкостей и относительного СКО дозирования жидкостей

Заключение по результатам поверки:

Поверитель:

Дата поверки:

(обязательное) к методике поверки МП 045.Д4-19 анализатора иммуноферментного автоматического EVOLIS Twin Plus серийный №: 6220000684

Значение плотности дистиллированной воды при значениях температуры в соответствии с ГОСТ 31992.1-2012 (ИСО 2811)

Таблица Б.1 - Значение плотности

воды

(обязательное) к методике поверки МП 045.Д4-19 анализатора иммуноферментного автоматического EVOLIS Twin Plus серийный №: 6220000684

• - вначале включить анализатор (выключатель «ON/OFF»), затем - ПК;

• - далее, запустить управляющую программу «2PS» на рабочем столе ПК.

Анализатор проведет самодиагностику, при положительном исходе которой будет отражено «Прошёл» на мониторе ПК.

’•Г

йа?з;9

2209 29   -

admin

Прошёл .   ^:

Прошёл. ■ Прошёл .

Прошел

Прршёл

Прошёл

— i              С»*X.

Рисунок В.1 - Результат самодиагностики

В главном меню управляющей программы анализатора выбрать последовательно: «Настройка» —► «Сервис» —► «Инкубаторы». Появится окно настройки параметров инкубатора.

Рисунок В.2 - Параметры инкубации

В.3.1 Подготовить комплект светофильтров поверочный КСП-02 (далее - комплект) к измерениям на анализаторе:

• - установить светофильтры №№ 1, 3, 4, 6-8, 16, 17 в оправку комплекта и, далее, в рамку комплекта в ряд № 2;

• - в ряд № 1 и ряды №№ 3-12 рамки установить оправки 96-луночного планшета для ИФА-анализа.

  

Рисунок В.З - Вид рамки, подготовленной для измерений

В.3.2 Подготовить анализатор к измерению оптической плотности на длине волны 405 нм:

- нажать клавишу «Новый Раб. лист» - клавиша 2 на панели главного меню;

1    2     3       4     5     6     7     8      9     10    11    12   13 14

Рисунок В.4 - Панель главного меню управляющей программы

• - нажать «Добавить планшет» —> «Добавить протокол» —* выбрать «405 нм» —► «Изменить раскладку»;

• - в появившимся окне «Раскладка планшета протокола» снять все выделения лунок и установить выделение для ряда № 2 планшета (т.е. по факту расположения КСП-02) —> «ОК» —* «ОК» —> «СТАРТ»; анализатор начнет подготовку к заданному протоколу измерений оптической плотности;

• - по запросу анализатора разместить подготовленную по п. В.З. 1 настоящего приложения рамку в фотометрический отсек анализатора - угол А1 рамки должен находится в дальнем правом углу.

  

Рисунок В.5 - Установка рамки в анализатор

В.3.3 Нажать «Старт» для начала измерений оптической плотности на длине волны 405 нм; результаты измерений отразятся на мониторе ПК. Изъять рамку из анализатора.

В.3.4 Для повтора измерений оптической плотности на выбранной длине волны повторить операции по п.п. В.3.2 - В.3.3 необходимое количество раз.

В.4.1 Подготовить анализатор к дозированию:

- разместить наконечники анализатора 300 мл для дозирующего устройства на рабочем столе анализатора;

Рисунок В.6 - Размещение наконечников

• - установить бутыль с дистиллированной водой в анализатор;

• - в главном меню анализатора выбрать: «Пипетирование» —* «Вставить шаг» —> «ОК»;

• - в окне «Пипетирование» выбрать: «Новый шаг» —> выбрать «галочки» по всем лункам —> нажать «Изменить шаг» —► указать объём дозирования 20 мкл —* «ОК».

  

Рисунок В.7 - Окно пипетирования

Далее, в данной позиции также будут устанавливаться объёмы дозирования 100 и 200 мкл.

В.4.2 Подготовить 96-луночные планшеты для ИФА-анализа (далее - планшет):

• - пронумеровать 15 планшет;

• - взвесить каждую планшету на весах; зафиксировать массу т_п, г, каждой планшеты в протокол поверки (см. приложение А к настоящей методике поверки);

• - разместить в открытом состоянии первую планшету в анализаторе.

В.4.3 Нажать «Старт» для запуска дозирования объёмом 20 мкл - анализатор наполнит установленную планшету дистиллированной водой в соответствии с заданным методом. По окончанию процедуры извлечь планшету и закрыть.

В.4.4 Взвесить на весах закрытую планшету, наполненную дистиллированной водой; зафиксировать массу т₃, г, каждой наполненной планшеты в протокол поверки (см. приложение А к настоящей методике поверки).

В.4.5 Повторить процедуру дозирования жидкости еще 4 раза для объёма 20 мкл.

В.4.6 Провести операции п.п.В.4.3 - В.4.5 для объёмов дозирования 100 и 200 мкл.

13