Методика поверки «Хроматографы "KNAUER"» (МП 205-07-2017)

УТВЕРЖДАЮ

Первый зам 4-т ль директора по науке

Ф. В. Булыгин

2017 г.

II «ВНИИМС»

МП 205-07-2017 г. Москва, 2017 г.

Настоящая инструкция распространяется на хроматографы KNAUER с детекторами: спектрофотометрическим Azura MWD 2.1 L, на диодной матрице Azura DAD 2.1 L, дифференциальным рефрактометрическим RID 2.1L, кондуктометрическим CDD-lOAvp фирмы «Wissenschaftliche Geratebau, Dr. Ing. Herbert Knauer GmbH», Германия (далее хроматографы) и устанавливает методику их первичной и периодической поверки.

Интервал между поверками - 1 год.

1.1 При проведении поверки выполняют операции, указанные в таблице 1. Таблица 1

Примечания:

При отсутствии НД на МИ, утвержденной в установленном порядке по ГОСТ Р 8.563 2009.

²⁾ При наличии НД на МИ.

• 1.2 Допускается проводить первичную и периодическую поверку хроматографа по письменному заявлению владельца с детекторами, с которыми хроматограф эксплуатируется.

При проведении поверки применяют следующие средства поверки.

• 2.1 ГСО 8749-2006 раствора антрацена в ацетонитриле с аттестованным значением массовой концентрации 0,2 мг/см³, границы допускаемого значения относительной погрешности ±2 % (Р=0,95).

• 2.2 ГСО 7813-2000 состава раствора хлорид - ионов в воде с массовой концентрацией 10 мг/см³, границы допускаемого значения относительной погрешности ±1 % (Р=0,95).

• 2.3 Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1-2011, с наибольшим пределом взвешивания 200 г.

• 2.4 Пипетки градуированные 1-1-2-1, 1-1-2-5 по ГОСТ 29227-91.

• 2.5 Стакан В-1-50ТС по ГОСТ 25336-82.

• 2.6 Колбы 2-10-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770-74.

• 2.7 Цилиндр 2-1000-2 по ГОСТ 1770-74.

• 2.8 Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная), ГОСТ Р 52501-2005.

• 2.9 Ацетонитрил для жидкостной хроматографии по ТУ 6-09-14-2167-84 или с аналогичными характеристиками чистоты и оптического поглощения.

• 2.10 Натрий углекислый кислый, ГОСТ 4201-79, х.ч.

• 2.11 Натрий углекислый, ГОСТ 83-79, х.ч.

• 2.12 Колонки хроматографические с фазой С18.

Допускается применение других средств поверки, обеспечивающих определение метрологических характеристик с требуемой точностью.

• 3.1 При выполнении поверки соблюдают правила техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности по ГОСТ 12.1.019-79 и пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91, а также требования, изложенные в руководстве по эксплуатации хроматографа.

При проведении поверки соблюдают следующие условия:

• - температура окружающей среды, °C                    от +15 до +30

• - относительная влажность, %                                  до 80

• 5.1 Хроматографы готовят к работе в соответствии с его руководством по эксплуатации.

• 5.2 Перед проведением поверки готовят элюенты и контрольные растворы, назначение которых и содержание в них анализируемых компонентов, приведены в таблице 2. Методика приготовления контрольных растворов и элюентов приведена в приложении 1.

Таблица 2

6 ПРОВЕДЕНИЕ ПОВЕРКИ

• 6.1 Внешний осмотр

При внешнем осмотре устанавливают:

• - соответствие комплектности хроматографа требованиям технической документации;

• - четкость маркировки;

• - исправность механизмов и крепежных деталей;

• - отсутствие дефектов, которые могут повлиять на работоспособность хроматографа.

• 6.2 Опробование

При опробовании проводят определение уровня флуктуационных шумов, дрейфа нулевого сигнала, предела детектирования.

Для проверки шума, дрейфа, заменяют водой подвижную фазу, если подвижная фаза не смешивается с водой, то сначала подвижную фазу заменяют промежуточным растворителем, который смешивается с подвижной фазой и водой. Затем заменяют этот растворитель водой, промывают автосамплер (инжектор) и насос. Соединяют регулятор давления, инжектор и детектор при помощи капилляров и фитингов, входящих в комплект поставки

• 6.2.1 Уровень флуктуационных шумов, дрейф нулевого сигнала определяют при условиях, указанных в таблице 3.

• 6.2.2 После выхода хроматографа на режим фиксируют в течение 1 часа нулевой сигнал каждого детектора на шкале с максимальной чувствительностью в координатах сигнал (выраженный в единицах детекции) - время.

Уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала (Ах) принимают равным максимальному значению амплитуды (h) повторяющихся колебаний нулевого сигнала с периодом не более 20 с.

Значение дрейфа нулевого сигнала принимают равным смещению нулевого сигнала в течение 1 часа.

Определение значений шума и дрейфа нулевого сигнала для кондуктометрического детектора проводят в режиме подавления фоновой электропроводности элюента. Таблица 3

6.2.2. Полученные значения уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала и дрейфа нулевого сигнала не должны превышать значений, приведенных в таблице 4. Таблица 4

• 6.2.3 Определение предела детектирования

Определение предела детектирования и метрологических характеристик выполняют на хроматографе, укомплектованном соответствующим детектором и аналитической колонкой, допускается использование капилляра согласно 6.2.1.

Предел детектирования определяют с использованием контрольных веществ и условий, указанных в таблице 2.

В хроматограф вводят пробу контрольного вещества, определяют высоту (h) и ширину пика на половине его высоты или площадь пика (S).

Предел детектирования рассчитывают по формулам

• - скорость элюента, см³/мин;

• - ширина пика на половине высоты, мин;

• - уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала, определенный до ввода контрольного вещества;

• - высота пика контрольного вещества;

Ах и Н - измеряют в мм, условных единицах либо в единицах детекции;

S - площадь пика контрольного вещества, мм с, условных единицах с, либо единицах детекции-с;

G - количество контрольного вещества, г;

G = 10-‘>CV_d„,      (2)

где С - массовая концентрация контрольного вещества, мг/дм³;

И_доз - объем введенной пробы контрольного вещества, мм³

10’⁹ - пересчетный множитель.

Полученные результаты не должны превышать значений пределов детектирования, приведенных в таблице 4.

• 6.3. Определение метрологических характеристик

• 6.3.1. Определение относительного среднего квадратичного отклонения выходного сигнала (по площади пика и времени удерживания).

После выхода прибора на режим в хроматограф вводят 10 раз контрольную смесь (таблица 2) и измеряют значения выходного сигнала (площади пика и времени удерживания) при условиях, указанных в таблице 3.

Относительное среднее квадратическое отклонение выходного сигнала ст_х , %, рассчитывают по формуле где X,- - i-oe значение выходного сигнала (площади пика, времени удерживания);

X - среднее арифметическое значение выходного сигнала (площади пика, времени удерживания);

п - количество инжекций.

Значения относительного среднего квадратического отклонения выходного сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 5.

• 6.3.2. Определение относительного изменения выходного сигнала (площади пика и времени удерживания) за 8 часов непрерывной работы хроматографа.

Через 8 часов непрерывной работы хроматографа измерения по п. 6.3.1 повторяют. Относительное изменение выходного сигнала (площади пика и времени удерживания) за 8 часов непрерывной работы прибора <5,, %, рассчитывают по формуле (3)

<У,=^100.       (4)

Л

где X - среднее арифметическое значение выходного сигнала (площади пика);

X, - среднее арифметическое значение выходного сигнала (площади пика) через 8 часов непрерывной работы хроматографа.

Полученные значения относительного изменения выходного сигнала хроматографа не должны превышать значений, приведенных в таблице 5.

Таблица 5

• 6.3.3 При проведении периодической поверки хроматографов, эксплуатируемых по НД на МИ, отвечающие требованиям ГОСТ Р 8.563-2009, проверяют показатели точности результатов измерений в соответствии с процедурами и нормативами контроля, регламентированными в методике измерений.

• 7.1 Результаты поверки хроматографов заносят в протокол произвольной формы.

• 7.2 Положительные результаты поверки хроматографов оформляют выдачей свидетельства о поверке в соответствии с «Порядком проведения поверки средств измерений, требования к знаку поверки и содержанию свидетельства о поверке» (утв. приказом Министерства промышленности и торговли РФ от 2 июля 2015 г. № 1815).

• 7.3 На хроматографы, не удовлетворяющие требованиям настоящей методики, выдают извещение о непригодности с указанием причин в соответствии с Порядком проведения поверки средств измерений, требования к знаку поверки и содержанию свидетельства о поверке (утв. приказом Министерства промышленности и торговли РФ от 2 июля 2015 г. № 1815).

Начальник отдела ФГУП «ВНИИМС»                .       С.В. Вихрова

Начальник сектора ФГУП «ВНИИМС», к.х.н.

О.Л. Рутенберг

МЕТОДИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПОДВИЖНЫХ ФАЗ И КОНТРОЛЬНЫХ РАСТВОРОВ

Методика предназначена для приготовления подвижных фаз (элюентов) и контрольных растворов антрацена, хлорид-ионов в соответствующих растворителях.

• 1 СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ПОСУДА, РЕАКТИВЫ

  • 1.1 ГСО 8749-2006 раствора антрацена в ацетонитриле с аттестованным значением массовой концентрации 0,2 мг/см³, границы допускаемого значения относительной погрешности ±2 % (Р=0,95).

  • 1.2 ГСО 7813-2000 состава раствора хлорид-ионов в воде с массовой концентрацией 10 мг/см³, границы допускаемого значения относительной погрешности ±1 % (Р=0,95).

  • 1.3 Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1-2011, с наибольшим пределом взвешивания 200 г.

  • 1.4 Пипетки градуированные 1-1-2-1,1-1-2-5 по ГОСТ 29227-91.

  • 1.5 Стакан В-1-50ТС по ГОСТ 25336-82.

  • 1.6 Колбы 2-10-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770-74.

  • 1.7 Цилиндр 2-1000-2 по ГОСТ 1770-74.

  • 1.8 Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизованная), ГОСТ Р 52501-2005.

  • 1.9 Ацетонитрил для жидкостной хроматографии по ТУ 6-09-14-2167-84 или с аналогичными характеристиками чистоты и оптического поглощения.

  • 1.10 Натрий углекислый кислый, ГОСТ 4201-79, х.ч.

  • 1.11 Натрий углекислый, ГОСТ 83-79, х.ч.

• 2 ПРОЦЕДУРА ПРИГОТОВЛЕНИЯ

  • 2.1 Приготовление подвижных фаз (элюентов).

    • 2.1.1 Приготовление раствора ацетонитрил-вода/ 84:16 (для поверки хроматографов с детекторами: спектрофотометрическим Azura MWD 2.1 L, на диодной матрице AzuraDAD 2.1 L, дифференциальным рефрактометрическим RID 2.1L).

В колбу вместимостью 1000 см³ помещают 840 см³ ацетонитрила, доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают, переливают в бутыль и закрывают крышкой. На бутыль наклеивают этикетку «ацетонитрил:вода/ 84:16».

• 2.1.2 Приготовление раствора, содержащего 1,8 мМ натрия карбоната + 1,7 мМ натрия гидрокарбоната в деионизованной воде (для поверки хроматографов с кондуктометрическим детектором CDD-10Avp).

Взвешивают в стакане 190,8 мг натрия углекислого и 142,8 мг натрия углекислого кислого, помещают взвешенные вещества в колбу вместимостью 1000 см³. Ополаскивают стакан деионизованной водой, переносят воду в колбу со взвешенными веществами, доводят раствор в колбе до метки деионизованной воды и перемешивают до полного растворения твердых веществ. Переливают полученный раствор в бутыль и закрывают крышкой. На бутыль наклеивают этикетку «1,8 мМ натрия карбоната +1,7 мМ натрия гидрокарбоната в деионизованной воде».

• 2.2 Приготовление контрольных растворов

• 2.2.1. В качестве контрольного раствора антрацена с массовой концентрацией 200 мг/дм³ используют ГСО 8749-2006.

• 2.2.2. Приготовление контрольного раствора антрацена с массовой концентрацией 10 мг/дм³.

1 см³ ГСО 8749-2006 состава антрацена в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,2 мг/см³ помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³, доводят до метки ацетонитрилом и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³, доводят ацетонитрилом до метки, перемешивают.

• 2.2.3. Приготовление контрольного раствора хлорид - ионов с массовой концентрацией 10 мг/дм³.

В колбу вместимостью 1000 см³ помещают 1 см³ ГСО 7813-2000 состава раствора хлорид - ионов в воде с аттестованным значением массовой концентрации 10 мг/см³, доводят до метки деионизованной водой, перемешивают.