Методика поверки «Хроматографы жидкостные "МАЭСТРО"» (ФАУН.414538.001 ДЛ)

Первый заместитель генер го директора-о научной работе ИИФТРИ»

замест

й»8-=

О. •« o-j

А.Н. Щипунов

2016 г.

/С

ИНСТРУКЦИЯ

ХРОМАТОГРАФЫ ЖИДКОСТНЫЕ «МАЭСТРО»

Методика поверки

ФАУНА 1453 8.001 ДЛ р.п. Менделеево 2016 г.

• 1 Операции поверки

• 2 Средства поверки

• 3 Требования безопасности

• 4 Условия поверки

• 5 Подготовка к поверке

• 6 Требования к квалификации поверителей

• 7 Проведение поверки

• 8 Оформление результатов поверки

Приложение А Методика приготовления контрольных растворов для поверки хроматографов жидкостных «МАЭСТРО»

Приложение Б Протокол поверки хроматографа жидкостного «МАЭСТРО» 14

Настоящая методика поверки распространяется на хроматографы жидкостные «МАЭСТРО» (далее по тексту хроматографы «МАЭСТРО»), изготавливаемые ООО «ИНТЕРЛАБ», г. Москва, и устанавливает процедуру их первичной и периодических поверок. Поверке подлежат все вновь выпускаемые, выходящие из ремонта и находящиеся в эксплуатации хроматографы «МАЭСТРО».

Интервал между поверками - один год.

1.1 При проведении первичной и периодической поверок, выполняют операции, указанные в таблице 1.

Таблица 1 - Операции поверки

1.2 При получении отрицательных результатов при проведении хотя бы одной операции поверка прекращается и хроматограф «МАЭСТРО» бракуется.

• 2 Средства поверки

2.1 При проведении поверки должны применяться средства измерений, реактивы и оборудование, указанные в таблице 2.

Таблица 2 - Средства поверки

Продолжение таблицы 2

Примечания - Допускается применение других средств поверки, допущенных к применению в РФ, обеспечивающих определение метрологических характеристик поверяемых хроматографов «МАЭСТРО» с требуемой точностью. Все средства измерений, используемые при поверке, должны иметь действующие свидетельства о поверке, а стандартные образцы - действующие паспорта.

• 2.2 Контрольные растворы для поверки готовятся согласно Приложению А настоящей методики.

• 3.1 При работе с хроматографом «МАЭСТРО» следует руководствоваться «Основными правилами безопасной работы в химической лаборатории», а также соблюдать ГОСТ 12.2.091-2012 «Безопасность электрического оборудования для измерения, управления и лабораторного применения».

• 3.2 При работе с хроматографом «МАЭСТРО» необходимо соблюдать «Противопожарные нормы» согласно СниП 2.01.02.

• 3.3 Лица, допускаемые к работе, должны иметь соответствующую техническую квалификацию и подготовку, ежегодно проходить проверку знаний техники безопасности.

' 4.1 При проведении поверки должны быть соблюдены следующие условия:

• - температура окружающей среды                        от 15 до 25 °C;

• - относительная влажность воздуха, при 20 °C              от 30 до 80 %;

• - атмосферное давление                                 от 84 до 106 кПа.

• 5.1 Перед проведением поверки должны быть выполнены следующие подготовительные работы:

• 1) при отсутствии нормативной документации (НД) на методику выполнения измерений, занесенной в Государственный реестр:

• - подготовка колонок,

• - приготовление контрольных растворов по приложению А.

• 2) при наличии НД на методику выполнения измерений, занесенной в Государственный реестр:

• - подготовка колонок,

• - приготовление элюента,

• - приготовление контрольных растворов.

• 5.2 Подключение блоков хроматографа, их включение осуществлять в соответствии с руководством по эксплуатации на хроматограф «МАЭСТРО» ФАУН.414538.001 РЭ.

• 5.3 Подготовительные операции, включение хроматографа «МАЭСТРО» следует проводить в соответствии с руководством по эксплуатации на хроматограф «МАЭСТРО» ФАУН.414538.001 РЭ «Хроматографы жидкостные «МАЭСТРО. Руководство по эксплуатации».

Элюент следует фильтровать и тщательно дегазировать, чтобы избежать образования пузырьков газов, растворённых в жидкости.

• 6.1 К проведению поверки допускаются лица, изучившие настоящую методику поверки и руководство по эксплуатации на хроматограф «МАЭСТРО» и средства поверки, а также аттестованные в качестве поверителя.

• 6.2 Для получения данных, необходимых для поверки, допускается участие операторов, обслуживающих хроматограф (под контролем поверителя).

• 7.1 Внешний осмотр

• 7.1.1 При проведении внешнего осмотра проверить:

• - отсутствие механических повреждений и ослабленных элементов конструкции, сохранность пломб, чистоту разъемов, состояние соединительных кабелей.

• - целостность корпуса, внешних элементов, отсутствие повреждений органов управления.

• 7.1.2 Хроматограф «МАЭСТРО», имеющий дефекты, бракуется и дальнейшей поверке не подлежит.

• 7.2 Опробование

Опробование хроматографа «МАЭСТРО» осуществляют в соответствии с руководством по эксплуатации ФАУН.414538.001 РЭ. При опробовании проверяется общее функционирование хроматографа «МАЭСТРО»: выход на режим, соответствие ПО, соответствие окон на дисплее, отсутствие сообщений об ошибке.

• 7.2.1 Идентификация программного обеспечения (ПО).

Идентификация ПО осуществляется следующим образом:

В главном окне программы в строке команд щелкнуть мышью на команде «Help». В открывшемся окне щелкнуть мышью по строке «About», в результате чего откроется окно, в котором приведены идентификационное название ПО и номер версии.

Результаты опробования положительные, если сообщений об обнаруженных ошибках не возникает, а номер версии ПО - 5.0.4.152 или выше. В противном случае хроматографы «МАЭСТРО» к дальнейшей поверке не допускается.

• 7.3 Определение уровня флуктуационных шумов АХ и дрейфа нулевого сигнала

Определение уровня флуктуационных шумов АХ и дрейфа нулевого сигнала проводить через 60 минут после включения хроматографа «МАЭСТРО».

Уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала принимают за значение амплитуды повторяющихся колебаний нулевого сигнала с полупериодом (длительностью им-пудьсов) не более 10 с.

За дрейф нулевого сигнала принимают наибольшее смещение средней линии нулевого сигнала в течение 1 часа. Продолжительность измерения дрейфа нулевого сигнала составляет 10 минут. Полученные значения дрейфа нулевого сигнала экстраполируют на период в 1 час.

• 7.3.1 Определение уровня флуктуационных шумов АХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с фотометрическим детектором с фиксированными длинами волн проводить при следующих условиях:

• - колонка Zorbax длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом С18, фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - элюент - 80 % раствор ацетонитрила в воде;

• - расход элюента 1 см³/мин;

• - длина волны - 254 нм.

Определить уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• - колонка Zorbax длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом С18, фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - элюент - 80 % раствор ацетонитрила в воде;

• - расход элюента 1 см³/мин;

• - длина волны возбуждения - 350 нм;

• - длина волны излучения - 375 нм.

Определить уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• 7.3.3 Определение уровня флуктуационных шумов ДХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с детектором на диодной матрице проводить при следующих условиях:

• - колонка Zorbax длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом С18, фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - элюент - 80 % раствор ацетонитрила в воде;

• - расход элюента 1 см³/мин;

• - длина волны - 254 нм.

Определить уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• 7.3.4 Определение уровня флуктуационных шумов ДХ и дрейфа нулевого сигнала при работе со спектрофотометрическим детектором проводить при следующих условиях:

• - колонка Zorbax длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом С18, фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - элюент - 80 % раствор ацетонитрила в воде;

• - расход элюента 1 см³/мин;

• - длина волны - 254 нм.

Определить уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• 7.3.5 Определение уровня флуктуационных шумов ДХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с рефрактометрическим детектором (при использовании детектора для анализа водных растворов) проводить при следующих условиях:

• - колонка Hi-Plex Са длиной 300 мм и внутренним диаметром 7,7 мм, заполненная сорбентом фракции 8 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - температура колонки - 80 °C;

• - температура ячейки - 35 °C;

• - элюент - вода;

• - расход элюента 1 см³/мин.

• 7.3.5.1 Определение уровня флуктуационных шумов ДХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с рефрактометрическим детектором (при использовании детектора для анализа растворов на основе органических веществ) проводить при следующих условиях:

• - колонка ZORBAX NH2 длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - температура колонки - 30 °C;

• - температура ячейки - 35 °C;

• - элюент - н-гептан;

• - расход элюента 1 см³/мин.

Определить уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• 7.3.6 Определение уровня флуктуационных шумов ДХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с флуориметрическим детектором с фиксированной длиной волны возбуждения проводить при следующих условиях:

• - колонка Zorbax длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом С18, фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - элюент - 80 % раствор ацетонитрила в воде;

• - расход элюента 1 см³/мин;

• - длина волны возбуждения - 365 нм;

• - длина волны излучения - 405 нм.

Определить уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов ДХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• 7.3.7 Определение уровня флуктуационных шумов ДХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с амперометрическим детектором проводить при следующих условиях:

• - колонка Zorbax длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом С18, фракции 5 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - потенциал электрода + 1,3 В;

• - элюент - 10 % раствор ацетонитрила в ортофосфорной кислоте (pH = 3);

• - расход элюента 1 см³/мин.

Определить уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

• 7.3.8 Определение уровня флуктуационных шумов АХ и дрейфа нулевого сигнала при работе с низкотемпературным испарительным детектором светорассеяния проводить при следующих условиях:

• - колонка Hi-Plex Са длиной 300 мм и внутренним диаметром 7,7 мм, заполненная сорбентом фракции 8 мкм (устанавливается по направлению потока элюента в соответствии со стрелкой на колонке);

• - температура колонки - 80 °C;

• - температура испарения - 80 °C;

• - элюент - вода;

• - расход элюента 1 см³/мин.

Определить уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity». Уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала не должны превышать значений, указанных в таблице 3.

Хроматографы «МАЭСТРО» признаются прошедшими поверку в соответствии с п. 7.3, если уровень шумов АХ и дрейф нулевого сигнала не превышают значений, указанных в таблице 3.

Примечание - Допускается использовать аналогичные колонки других изготовителей, типоразмеров и маркировок, не ухудшающих измеряемые величины по сравнению с приведенными колонками.

• 7.4 Определение относительного среднего квадратического отклонения (далее по тексту - ОСКО, <л) выходного сигнала хроматографа «МАЭСТРО»

С помощью ПО Clarity установить рабочие параметры хроматографа «Маэстро» по п.п. 7.3.1 -7.3.8.

Для определения значения относительного среднего квадратического отклонения выходного сигнала хроматограф «МАЭСТРО» всех исполнений должен быть подвергнут технологической наработке. Ввести не менее трех раз контрольное вещество (таблица 3) для насыщения колонки, а затем провести шесть вводов контрольного вещества (объем каждой вводимой пробы от 5 до 50 мкл) с регистрацией времени удерживания (далее — ti), высоты (далее - hi) и площади пика контрольного вещества (далее — Si) (согласно «Руководство пользователя» ПО «Clarity»).

С помощью ПО определить ОСКО выходного сигнала по высоте, площади пика и времени удерживания.

Возможно провести расчет ОСКО вручную по формулам (1), (3) и (5) соответственно:

i=l

п

п

i=l

п-Х

п

/=1

^S=Z^S<>                          (6)

i=l

где hi, ti, Si - i-oe значение результатов измерений по высоте пика, времени удерживания и площади пика соответственно; h, t, S - среднее арифметическое результатов измерений по высоте пика, времени удерживания и площади пика соответственно, Xoj', и - количество измерений. Значения относительного среднего квадратического отклонения выходных сигналов не должны превышать значений, приведенных в таблице 4.

Таблица 4 - Допускаемые значения ОСКО выходного сигнала хроматографа при различном способе ввода пробы

Хроматографы «МАЭСТРО» признаются прошедшими поверку в соответствии с подразделом 7.4 если значения ОСКО выходных сигналов не превышают значений, приведенных в таблице 4.

• 7.5 Определение предела детектирования C_min.

• 7.5.1 При определении предела детектирования C_min использовать средние значения площадей пиков контрольных веществ, полученные при определении значений относительного среднего квадратического отклонения площадей пиков ot в п.7.4.

Предел детектирования C_min, г/см³, рассчитать по формуле (7):

_2-ДХ-т

min s-U ’                                     '

где: ДХ - измеренная по пп. 7.3.1 - 7.3.8 величина уровня флуктуационных шумов для фотометрического, спектрофотометрического или диодно-матричного детекторов, мБ; для флуориметрических детекторов и низкотемпературного испарительного детектора светорассеяния, мВ; для рефрактометрического детектора, ед. рефр, для амперометрического детектора нА; m - масса введенного контрольного вещества, г; S - площадь пика для фотометрического, спектрофотометрического или диодноматричного детекторов, мБ-c; для флуориметрических детекторов и низкотемпературного испарительного детектора светорассеяния мВ-с; для рефрактометрического детектора, ед.рефр-с, для амперометрического детектора нА-c; U - расход элюента, см³/с.

Массу введенного контрольного вещества m рассчитать по формуле (8):

rn = C₀-V_g,                                              (8)

где Со - концентрация контрольного вещества в растворе, г/см³ (таблица 3); V_g - объем вводимого контрольного вещества, см³.

Хроматографы «МАЭСТРО» признаются прошедшими поверку в соответствии с п. 7.5 если пределы детектирования Cmin для каждого детектора не превышают значений указанных в таблице 3.

• 7.6 Определение относительного изменения выходных сигналов за 8 ч непрерыв

  ной работы s •

Для определения относительного изменения выходных сигналов за 8 ч непрерывной работы, хроматограф «МАЭСТРО» всех исполнений должен быть подвергнут технологической наработке. С помощью ПО «Clarity» установить рабочие параметры хроматографа «МАЭСТРО» по п.п. 7.3.1 - 7.3.8.

Определить среднее значение для каждого j-ro выходного сигнала X_Oj, полученью в п. 7.4. Через 8 ч непрерывной работы хроматографа «МАЭСТРО» всех исполнений, измерения, проводимые в п. 7.4, повторить и вновь определить средние значения выходных сигналов X_tJ.

Относительное изменение выходных сигналов , %, хроматографа «МАЭСТРО» всех исполнений за цикл измерений 8 ч определить по формуле (9):

где X_OJ и X_tj - средние арифметические значения десяти измерений j-ro выходного сигнала, полученные в начале и конце 8 ч непрерывной работы хроматографа «МАЭСТРО» всех исполнений.

В течение 8 ч не допускается корректировка рабочих условий (расходов элюента, температуры термостата).

Хроматографы «МАЭСТРО» признаются прошедшими поверку в соответствии с п. 7.6 если значение относительного изменения 5t j-ro выходного сигнала за время измерений 8 ч находится в пределах ±10 %.

• 8.1 При положительных результатах поверки оформляется свидетельство о поверке установленного образца в соответствии с Приказом Минпромторга № 1815 от 02.07.2015. При этом знак поверки в виде наклейки наносится на свидетельство о поверке.

• 8.2 При отрицательных результатах поверки выдается извещение о непригодности с указанием причины непригодности в соответствии с Приказом Минпромторга № 1815 от 02.07.2015.

  

  Стахеев

Начальник лаборатории № 671

ФГУП «ВНИИФТРИ»

ПРИЛОЖЕНИЕ А

А.1 Для приготовления контрольных растворов применяют следующее оборудование и реактивы:

• - Колбы мерные 2-го класса точности с притёртой пробкой по ГОСТ 1770-74.

• - Пипетки градуированные 2-го класса точности по ГОСТ 29169-91.

• - Раствор антрацена в ацетонитриле (200 мкг/см³) ГСО 8749-2006.

• - Стандартный образец состава раствора глюкозы, массовая концентрация 1 г/дм³ ГСО 9280-2008.

• - Вода Гой степени очистки по ГОСТ Р 52501-2005.

• - Ацетонитрил для жидкостной хроматографии о.с.ч. по ТУ 6-09-5449-89.

А.2 Приготовление поверочных растворов с использованием жидких стандартных образцов.

А.2.1 Используя формулу (А. 1) проводят расчет объема стандартного образца и объема растворителя, необходимых для получения раствора с массовой концентрацией контрольно вещества, требуемой для поверяемого детектора (см. таблицу 3 настоящей методики поверки).

АЛЛ При помощи градуированной пипетки переносят необходимый объем стандартного образца в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см³ (или 1000 см³), разбавляют до метки растворителем и перемешивают.

А.2.3 Действительное значение массовой концентрации контрольного вещества в растворе (Ci, см³) вычисляют по формуле (А.1):

(А.1)

где Со - действительное (паспортное) значение массовой концентрации контрольного вещества в стандартном образце, мкг/см³; Vo - объем стандартного образца, использованный для приготовления данного раствора; V_K - общий объем приготовленного раствора (100 см³ или 1000 см³).

АЛА При необходимости проводят повторное разбавление полученного поверочного раствора.

А.З Погрешность действительного значения концентрации поверочного раствора рассчитывают с учётом процедуры их приготовления по формуле (А.2):

где с - концентрация контрольного раствора, мкг/ см³; Vi - объём раствора, отмеряемый пипеткой, см³; AVi- предел погрешности используемой пипетки, см³; V2- объём мерной колбы, см³; AV₂ - предел погрешности используемой колбы, см³; 3 - предел обнаружения примеси при контроле чистоты растворителя, мкг/см³; СА-аттестованное значение концентрации компонента в ГСО, мкг/см³; Аса - абсолютная погрешность аттестованного значения ГСО или массовая концентрация примесей в реактиве (чистом веществе), мкг/см³.

А.3.1 Характеристики СИ, используемых для приготовления поверочных растворов

А.З .2 При использовании средств измерений и стандартных образцов и реактивов, указанных в п.1, настоящего приложения, относительная погрешность поверочного раствора, приготовленного по данной методике, находится в пределах ±5  %.

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

(Обязательное) ПРОТОКОЛ поверки хроматографа жидкостного «МАЭСТРО»_______ФАУН.414538.001________

исполнение                 обозначение

Изготовитель____________________год изготовления_________________

Заводской номер_____________, Версия ПО Clarity___________________

Условия поверки:

Температура окружающего воздуха_____________°C;

Относительная влажность______________________%;

Атмосферное давление______________________кПа.

РЕЗУЛЬТАТЫ ПОВЕРКИ

• 1 Результаты внешнего осмотра______________________________________________

• 2 Результаты определения уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала

  Значение уровня шумов
  по паспорту	действительное

3 Результаты определения дрейфа нулевого сигнала

4 Результаты определения значения относительного среднего квадратического отклонения выходного сигнала хроматографа

5 Результаты определения изменения выходных сигналов за 8 ч непрерывной работы

Поверитель______________________ "____"____________________201__г.

ЛИСТ РЕГИСТРАЦИИ ИЗМЕНЕНИЙ

15