Методика поверки «ГСИ. Хроматографы жидкостные Flexar» (МП-242-2297-2019)

Методика поверки

Тип документа

ГСИ. Хроматографы жидкостные Flexar

Наименование

МП-242-2297-2019

Обозначение документа

ВНИИМ им. Д.И. Менделеева

Разработчик

904 Кб
1 файл

ЗАГРУЗИТЬ ДОКУМЕНТ

  

Федеральное государственное унитарное предприятие

«Всероссийский научно-исследовательский институт метрологии им. Д.И. Менделеева» ФГУП «ВНИИМ им.Д.И.Менделеева»

Государственная система обеспечения единства измерений

Хроматографы жидкостные Flexar

Методика поверки

МП-242-2297-2019

Заместитель руководителя отдела госэталнов

Старший научный сотрудник

г. Санкт-Петербург 2019

2 Настоящая методика поверки распространяется на жидкостные хроматографы Flexar со следующими типами детекторов:

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector); спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector); рефрактометрический детектор (RI Detector);

флуоресцентный детектор (FL Detector)

и устанавливает методы и средства их первичной поверки после ввода в эксплуатацию и после ре-юнта и периодической поверки в процессе эксплуатации. Интервал между поверками - 1 год.

1 ОПЕРАЦИИ ПОВЕРКИ

1.1 При проведении поверки должны выполняться операции, указанные в таблице 1. Таблица 1

Наименование операции

Номер пункта методических указаний

Обязательное проведение операции

в эксплуатации

после ремонта

Подготовка к поверке

5

да

да

Внешний осмотр

6.1

да

да

Опробование

6.2

да

да

Подтверждение соответствия программного обеспечения

6.2.2

да

да

- определение уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала и дрейфа нулевого сигнала

6.2.3-6.2.6

да”

да”

- определение пределов детектирования детекторов

6.2.7

да”

да”

Определение метрологических характеристик:

6.3

да

да

- определение относительного среднего квадратичного отклонения выходного сигнала

6.3.1-6.3.4

да”

да”

- определение относительного изменения выходного сигнала за 4 часа непрерывной работы

6.3.5-6.3.6

да”

да”

Определение метрологических характеристик по НД на методики (методы) измерений

-

да2)

нет

Примечания:

  • 1) При отсутствии НД на методику (метод) измерений по ГОСТ 8.563-2009.

  • 2) При наличии НД на методику (метод) измерений по ГОСТ 8.563-2009.

При наличии нормативных документов по ГОСТ 8.563-2009 на методику выполнения измерений опробование хроматографов проводят путем проверки их работоспособности в соответствии с НД на них, а определение метрологических характеристик, в соответствии с МИ 2531-99 «Анализаторы состава веществ и материалов универсальные. Общие требования к методикам поверки в условиях эксплуатации», проводится с использованием образцов для контроля (ГСО, аттестованные смеси), материалов, реактивов, вспомогательного оборудования в соответствии с требованиями НД на МВИ. При выполнении поверки с использованием МВИ, пункты, отмеченные индексом 1 ’ в таблице 1, не выполняются.

Поверка проводится только для тех детекторов, которые установлены на поверяемом приборе или в соответствии с указанными в заявкой на поверку.

2 СРЕДСТВА ПОВЕРКИ, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ

  • 2.1. Основные средства поверки:

  • - ГСО 7814-2000 или ГСО 7333-96 СО состава толуола или толуол (ч.д.а.) по ГОСТ 5789-78.

-ГСО 8749-2006 СО состава раствора антрацена в ацетонитриле.

  • - Сахароза (ч.д.а. или х.ч.) по ГОСТ 5833-75.

  • 2.2. Растворители для приготовления поверочных растворов

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии по ТУ 6-09-14-2167-84.

Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная или деионизированная), ГОСТ Р 652501-2005.

  • 2.3. Вспомогательные средства поверки.

Колбы мерные второго класса точности с притертой пробкой по ГОСТ 1770-74.

Пипетки второго класса точности ГОСТ 29227-91.

1-канальные механические дозаторы с переменным объемом дозирования.

Весы лабораторные высокого класса точности по ГОСТ OIML R 76-1-2011.

Барометр, зарегистрированный в Федеральном информационном фонде по обеспечению единства измерений.

Термогигрометр электронный или гигрометр психометрический, зарегистрированные в Федеральном информационном фонде по обеспечению единства измерений.

Колонка для ВЭЖХ/УВЖЭХ (С-18) длинна 3-25 см, внутренний диаметр 2.1-4.6 мм, размер частиц наполнителя 1.9-5 мкм.

Допускается применение аналогичных средств поверки, обеспечивающих определение метрологических характеристик поверяемых хроматографов с требуемой точностью.

3 ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ

Требования безопасности должны соответствовать рекомендациям, изложенным в Руководстве по эксплуатации.

4 УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ПОВЕРКИ

При проведении поверки соблюдают следующие условия:

  • - температура окружающего воздуха, °C                           20 ± 5

  • - относительная влажность воздуха, %                             Не более 80

  • 5. Подготовка к поверке и требования к квалификации поверителей

5.1. Приготовить необходимый контрольный раствор, указанный в таблице 2. Методика приготовления контрольных растворов приведена в приложении А к настоящей методике поверки. Таблица 2

Наименование смеси

Концентрация анализируемого

компонента

Детектор

1. Антрацен в ацетонитриле

1 х 10'7 - 1 х 10’5 г/мл

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector), спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector)

2. Антрацен в ацетонитриле

2x1 О’4 — 1хЮ’2г/мл

рефрактометрический детектор (RI Detector)

3. Антрацен в ацетонитриле

1 х 10’9 - 1 х 10’7 г/мл

флуоресцентный детектор (FL Detector)

4. Толуол в ацетонитриле

2хЮ-5-2хЮ’3г/мл

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector), спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector)

5. Толуол в ацетонитриле

2x1 О'4 - 1хЮ*2г/мл

рефрактометрический детектор (RI Detector)

6. Толуол в ацетонитриле

5хЮ-’-2хЮ-5г/мл

флуоресцентный детектор (FL Detector)

7. Сахароза в воде

2x1 О’4- Iх Ю’З г/мл

рефрактометрический детектор (RI Detector)

  • 5.2. К проведению измерений по поверке допускаются лица, изучившие руководство по эксплуатации и методику поверки детектора.

Для получения данных, необходимых для поверки, допускается участие операторов, обслуживающих детектор (под контролем поверителя).

  • 5.3 Поверка проводится с использованиехм одного из вышеприведенных контрольных растворов для каждого конкретного детектора (по выбору владельца).

6. ПРОВЕДЕНИЕ ПОВЕРКИ

  • 6.1. Внешний осмотр

При проведении внешнего осмотра проверяют:

  • - отсутствие механических повреждений;

  • - соответствие комплектности прибора технической документации:

  • - надежность крепления соединительных элементов.

  • 6.2. Опробование

  • 6.2.1. Опробование (самотестирование прибора) производится автоматически после включения питания и запуска программного обеспечения. В случае успешного прохождения опробования (тестирования) на экране монитора появляется стартовое окно программы управления прибором.

  • 6.2.2. Проверка соответствия программного обеспечения

  • 6.2.2.1. Проверка осуществляется следующим образом:

а) При использовании ПО TotalChrom Navigator (Workstation или Client/Server)

- в главном окне программы TotalChrom Navigator в строке команд щелкнуть мышью на команде «Help». В открывшемся окне щелкнуть мышью по строке About TotalChrom Navigator в результате чего откроется окно, в котором приведены идентификационное название ПО и номер версии. Копия экрана с возможными окнами приведена на рисунке 1.

TotalChrom

Version 6.3.2

Copyright E 2008 PerkinElmer, Inc

PerkinElmer is a registered trademark of PerkinElmer Inc TotalChrom is a trademark of PerkinElmer. Inc

PerkinE me:

For the Better Portions Copyright 1996 The Microsoft Corporation Portions Copyright 1999 Blaise Software Services. Inc

Tidestone Formula One Copyright 1993-2000 Tidestone Technologies. Inc

T otalChrom Navigator

Veit-юп 6 3.2 0646

Close |

TotalChrom Client'Server

TotalChrom

Version 6.3.3

Copyright © 2008-2017 PerkinElmer. Inc

PerkinElmer is a registered trademark of PerkinElmer. me TctaiCnrom is a trademark of PerkinElmer. Inc

PerkinElmer’

Fer the Better

Portions Copynght 1996 The Microsoft Corporation

Portuns Cooynght 1999 Blaise Software Services Inc

Tidestone Formula Oe Copyright 1993-2000 Tidestore Technologies inc

TotafChrorn Navigator

Vernon 6 3 30691

Close |

Рисунок 1. Окно с идентификационными данными ПО TotalChrom Navigator (Workstation или Client/server).

Детектор считается выдержавшим поверку по п. 6.2.2, если номер версии ПО - 6.3.2.0 или выше.

б) При использовании ПО Chromera

- в главном окне программы Chromera

в строке команд щелкнуть мышью на команде «Help». В открывшемся окне щелкнуть мышью по строке About Chromera в результате чего откроется окно, в котором приведены идентификационное название ПО и номер версии. Копия экрана с возможными окнами приведена на рисунке 2.

^5 Chromera

V

^Chromera

Key S/N 918545479

Version 3.4.1.5904

Copyright © 2006-2012 PerkinElmer, Inc

Г OK . 3

Рисунок 2 - Окно с идентификационными данными ПО Chromera.

Детектор считается выдержавшим поверку по п. 6.2.2, если номер версии ПО - 3.2.0 или выше.

  • 6.2.3 Определение уровней флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала.

При опробовании проводят определение уровней флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала. Дрейф нулевого сигнала для флуоресцентного детектора (FL Detector) не определяется.

Уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала (АХ) принимают равным амплитуде (h) повторяющихся колебаний нулевого сигнала с периодом не более 20 секунд.

За дрейф нулевого сигнала принимают наибольшее смещение уровня нулевого сигнала в течение 1 ч при регистрации сигнала без ввода пробы. Допускается регистрировать нулевой сигнал в течение 30 мин с последующей экстраполяцией до 1 ч.

Значения дрейфа нулевого сигнала (D) принимают равным смещению нулевого сигнала (Н) в течение 1 часа.

Для сканирующего спектрофотометрического детектора (UV-Vis Detector), спектрофотометрического детектора с диодной матрицей (PDA Detector), рефрактометрического детектора (RI Detector) процедура измерения шума и дрейфа осуществляется согласно приведенной в пункте 6.2.3.1 процедуре и с помощью программного обеспечения «Chromera» или «Totalchrom Navigator».

Для флуоресцентного детектора процедура измерения шума (дрейф не измеряется) осуществляется согласно приведенной в пункте 6.2.3.2 процедуре и с помощью программного обеспечения «Chromera» или «Totalchrom Navigator».

Все измерения проводятся после выхода хроматографа на режим и стабилизации параметров в течение не менее 1 часа.

  • 6.2.3.1 Описание процедур измерения дрейфа и флуктуационных шумов спектрофотометрического детектора (UV-Vis Detector), спектрофотометрического детектора с диодной матрицей (PDA Detector), рефрактометрического детектора (RI Detector):

а) - заполнить измерительную ячейку (и ячейку сравнения для рефрактометрического детектора) водой.

б) - заглушить выход и вход детектора.

в) - направить элюент из насоса на слив.

г) - задать параметры метода, указанные в таблице 3.

д) - провести обнуление сигнала детектора и оставить прибор в работающем состоянии минимум на 20 минут.

е) - запустить проведение измерения с помощью программы управления хроматографом.

ж) - обработать полученный файл результата вручную или при помощи программы «Chromera» или «Totalchrom Navigator». Результат по шуму и дрейфу для спектрофотометрических детекторов приводится в единицах оптической плотности, для рефрактометрического детектора в единицах рефракции.

Таблица 3

Детектор

UV-Vis Detector

PDA Detector

RI Detector

Элюент

вода

вода

вода

Скорость потока элюента, см3/мин

0,1

0,1

0,1

Длина волны, нм

245

245

-

Постоянная времени, с

0,5-1

0,5-1

0,5-1

  • 6.2.3.2 Описание процедур измерения флуктуационных шумов (дрейф не нормируется) флуоресцентного детектора (FL Detector):

а) - установить поток подвижной фазы (вода) в детектор равный 1 мл/мин.

б) - установить длины волн возбуждения и эмиссии X = 280/390, провести обнуление сигнала детектора и оставить прибор в работающем состоянии минимум на 20 минут.

в) - запустить проведение измерения с помощью программы управления хроматографом. Время измерения 20 мин.

г) - обработать полученный файл результата вручную или при помощи программы «Chromera» или «Totalchrom Navigator». Результат по шуму приводится в единицах флуоресценции (FLu).

  • 6.2.3.3 Полученные значения уровней флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала не должны превышать значений, приведенных в таблице 4.

Таблица 4

Наименование детектора

Шум

Дрейф

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector)

^хЮ^Б

1хЮ^Б/ч

спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector)

1х10-5Б

1хЮ"3Б/ч

рефрактометрический детектор (R.I Detector)

1,5x10’’

ед. рефр.

4x10"7 ед. рефр./ч

флуориметрический (FL Detector)

Не нормируется

6.2.4 Определение предела детектирования

Предел детектирования определяют с использованием контрольных веществ и условий, указанных в таблице 5 (концентрации контрольных растворов указаны в таблице 2).

Таблица 5

Контрольный раствор

Объем пробы, мкл

Длина волны

Элюент

Скорость потока элюента, см3/мин

Детектор

Антраценацетонитрил

10-100

254

Ацетонитрил: вода

60:40-90:10

0,5-1.5

UV-Vis Detector

PDA Detector

Антраценацетонитрил

10-100

-

Ацетонитрил: вода

60:40-90:10

0,5-1,5

RI Detector

Антраценацетонитрил

10-100

250/390

280/390

Ацетонитрил: вода

60:40-90:10

0,5-1,5

FL Detector

Толуолацетонитрил

10-100

254

263

Ацетонитрил: вода

60:40-90:10

0,5-1,5

UV-Vis Detector

PDA Detector

Толуолацетонитрил

10-100

-

Ацетонитрил: вода 60:40-90:10

0,5-1,5

RI Detector

Толуолацетонитрил

10-100

254/280

263/280

Ацетонитрил: вода 60:40-90:10

0,5-1,5

FL Detector

* Сахарозавода

10-100

-

Вода

0,5-1,5

RI Detector

* Примечание: при использовании контрольных смесей с сахарозой (рефрактометрический детектор) определение предела детектирования может проводится без ВЭЖХ колонки. Дозирующее устройство соединяется с детектором напрямую. Для стабилизации работы насоса при измерении метрологических характеристик детектора допускается использовать сопротивление (рестриктор) с противодавлением около 3500-6900 кПа.

В хроматограф вводят пробу контрольного вещества, определяют высоту и ширину пика на половине его высоты , )

Предел детектирования (г/см?) рассчитывают по формуле:

2 • Лх • G

мин.

где G

V

  • - количество контрольного вещества, г;

  • - скорость элюента, см3/сек;

JU.     - ширина пика на половине высоты, сек;

Дх - уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала, определенный по п.п.6.2.3; Н      - высота пика контрольного вещества;

Н *   . - данное произведение может быть заменено площадью пика (S)

Sxu Н - измеряют в единицах, соответствующих конкретному детектору.

Полученные результаты предела детектирования не должны превышать значений, приведенных

в таблице 6.

Таблица 6

Наименование детектора

Предел обнаружения, г/см3, не более

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector)

Антрацен - 1,0-1 О*9

Толуол - 1,0-1 О*7

спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector)

Антрацен - 2,0-10'9

Толуол- 2,0-10’7

рефрактометрический детектор (RJ Detector)

Сахароза-2,0-10’7

Толуол - 2,0-10'5

Антрацен - 2,0-10'?

флуориметрический (FL Detector)

Антрацен- 1,0-1 О*12

Толуол - 1,0-1 О*9

6.3 Определение метрологических характеристик

6.3.1 Определение относительного среднего квадратичного отклонения выходных сигналов.

Измерения проводят после выхода хроматографа на режим. Условия выполнения измерений должны соответствовать приведенным в разделе 6.2.4.

  • 6.3.1.2 Контрольный раствор (табл.2.) вводят в хроматограф не менее 6 раз, измеряют значения выходных сигналов (площадей пиков и времен удерживания) и вычисляют их среднее арифметическое значение.

  • 6.3.1.3 Относительное среднее квадратичное отклонение выходного сигнала рассчитывают по формуле:

100 |Z(x,.-T)2

СГ = ^-д---------- ,

X V W-1

где X _ значение параметра выходного сигнала (площади пика, времени удерживания), п - количество измерений.

  • 6.3.1.4. Результаты испытаний по п.6.3.1 считают положительными, если значение ОСКО выходного сигнала детектора по времени удерживания и площади пика не превышают значений, указанных в таблице 7.

Таблица 7

Наименование детектора

ОСКО,%, не более:

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector)

Площади пика - 1,5

Времени удерживания - 1,0

спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector)

Площади пика - 1,5

Времени удерживания - 1,0

рефрактометрический детектор (RI Detector)

Площади пика - 3,0

Времени удерживания - 1,0

флуориметрический (FL Detector)

Площади пика - 3,0

Времени удерживания - 1,0

  • 6.3.2 Определение относительного изменения выходных сигналов за 4 часа непрерывной работы (по площади пика).

Условия измерения аналогичны, описанным в разделе 6.2.4. Через 4 часа непрерывной работы повторяют измерения по п.6.2.4. Контрольный образец вводится в хроматограф не менее 2 -х раз.

Относительное изменение выходного сигнала за 4 часа непрерывной работы хроматографа рассчитывают по формуле

Xt -X

где: X — среднее арифметическое значение выходного сигнала (площади пика) в начальный момент времени.

Xi— среднее арифметическое значение выходного сигнала (площади пика) через 4 часа.

  • 6.3.2.1. Результаты испытаний по п.6.3.2 считают положительными, если значение ОСКО выходного сигнала детектора по времени удерживания и площади пика не превышают значений, указанных в таблице 8.

Таблица 8.

Наименование детектора

Относительное изменение выходного сигнала за 4 часа непрерывной работы (по площади пика), %, не более

сканирующий спектрофотометрический детектор (UV-Vis Detector)

3,0

спектрофотометрический детектор с диодной матрицей (PDA Detector)

3,0

рефрактометрический детектор (RI Detector)

4,0

флуориметрический (FL Detector)

4,0

7. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ПОВЕРКИ

  • 7.1. Данные, полученные при поверке, оформляются в виде протокола, по форме установленной в организации, поводящей поверку.

  • 7.2. Хроматограф, удовлетворяющий требованиям настоящей методики поверки, признается годным и на него оформляется свидетельство о поверке по установленной форме.

На оборотной стороне свидетельства приводится следующая информация:

-результаты опробования и внешнего осмотра;

-результат подтверждения соответствия ПО;

- результаты определения метрологических характеристик;

  • 7.3. Хроматограф не удовлетворяющие требованиям настоящей методики, к дальнейшей эксплуатации не допускается и на него выдается извещение о непригодности.

  • 7.4. Знак поверки наносится на лицевую панель хроматографа и (или) на свидетельство о поверке.

ПРИЛОЖЕНИЕ А Методика приготовления контрольных смесей

Настоящая инструкция устанавливает методику приготовления контрольных смесей, предназначенных для определения метрологических характеристик хроматографа.

Диапазон содержания контрольного компонента - от 1 * 10‘9 до 1*10‘2 г/см3. Относительная погрешность массовой концентрации контрольного компонента не превышает 10 %.

1. Процедура приготовления контрольных смесей.

  • 1.1. Контрольные смеси в диапазоне от 1 * 10’3 до 1x10’2 г/см3приготавливают объемно -весовым методом. Массовую концентрацию контрольного компонента (Ci) определяют по формуле

Со= mi/V

где: mi - масса контрольного компонента, г;

V - объем приготовленной смеси, см3.

  • 1.2.  Исходные вещества, используемые для приготовления контрольной смеси, выдерживают не менее 2 ч в лабораторном помещении.

  • 1.3. Температура окружающей среды при приготовлении контрольных смесей не должна изменяться более, чем на 4°С.

  • 1.4. Определяют массу (mi) мерной колбы вместимостью 100 мл. Результат взвешивания записывают до третьего десятичного знака.

  • 1.5. В мерную колбу вносят навеску контрольного компонента и вновь взвешивают колбу (m2).

  • 1.6. Вычисляют массу контрольного компонента (т) в г.

т = m2 - mi

  • 1.7. В колбу с контрольным компонентом вводят от 20до 25 мл растворителя, перемешивают содержимое и доводят объем раствора до 100 мл. Тщательно перемешивают раствор.

Допускается использовать навески другой массы (но не менее 0,05г) и мерные колбы другого объема.

  • 1.8. Рассчитывают массовую концентрацию контрольного компонента по п. 1.1.

  • 1.9. Контрольные смеси с содержанием контрольного компонента менее 1 мг/смприготавливают объемным методом путем последовательного разбавления более концентрированных растворов. Массовую концентрацию контрольного компонента рассчитывают по формулам

Ci = CoxVanl/V

C2 = CixV^2/V

Cn = Cn-1 х Va.i п /V

где:      n - номер ступени разбавления исходного контрольного раствора с

концентрацией Со.

Va.ii, V ал2, Vn п - объем аликвоты (мл) растворов с концентрацией Со, Ci,Cn-i соответственно, г/см3.

V - объем мерной колбы, используемой для разбавления

  • 2.10. Перед каждым разбавлением рассчитывают значение аликвоты раствора (Vi, V2, Vn), исходя из заданного значения концентрации контрольного компонента (Со, Ci, Cn-i), концентрации разбавляемого раствора и объема мерной колбы, используемой для разбавления.

  • 2.11. В мерную колбу нужного объема (объем варьируется в зависимости от степени разбавления) наливается соответствующий растворитель 1/3 - 1/2 от объема колбы. Пипеткой или механическим дозатором вносят в колбу аликвоту разбавляемого раствора, после чего доводят растворителем колбу до метки. Растворителем доводят колбу до метки и тщательно перемешивают полученный раствор.

Настройки внешнего вида
Цветовая схема

Ширина

Левая панель