Методика поверки «Государственная система обеспечения единства измерений Комплексы аппаратно-программные для медицинских исследований на базе хроматографа «ХРОМАТЭК – КРИСТАЛЛ 5000» Методика поверки» (214.2.840.043-04Д)

СОГЛАСОВАНО

Директор

ЦСМ»

Государственная система обеспечения единства измерений

Комплексы аппаратно-программные для медицинских исследований на базе хроматографа «ХРОМАТЭК - КРИСТАЛЛ 5000»

Методика поверки

214.2.840.043-04Д г. Йошкар-Ола 2021 г.

• 1.  Общие положения

• 2.  Перечень операции поверки

• 3.  Требования к условиям проведения поверки

• 4.  Требования к специалистам, осуществляющим поверку

• 5.  Метрологические и технические требования к средствам поверки 5

• 6.  Требования по обеспечению безопасности проведения поверки 8

• 7.  Внешний осмотр

• 8.  Подготовка к поверке и опробование

• 9.  Проверка программного обеспечения

• 10. Определение метрологических характеристик и подтверждение соответствия комплекса метрологическим требованиям

• 11. Оформление результатов поверки

Приложение А

Приложение Б

Приложение В

Приложение Г

Приложение Д

1 ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Настоящая методика распространяется на комплексы аппаратно-программные для медицинских исследований на базе хроматографа «Хроматэк - Кристалл 5000», изготовленные по ТУ 9443-004-12908609-99 (далее - комплексы) и устанавливает методы и средства первичной и периодической поверок.

В случаях, не предусмотренных данной методикой, поверка выполняется в соответствии с нормативной документацией на проведение анализа (ГОСТ, РД, МУ, ТУ, МИ и Т.Д.).

Допускается проводить:

• -   первичную поверку комплексов с детекторами, входящими в комплект комплекса в соответствии с заказом;

• -   периодическую поверку комплекса с меньшим или большим количеством детекторов, чем указано в спецификации при поставке, на основании письменного заявления владельца комплекса.

При поверке должна быть обеспечена прослеживаемость комплексов к ТЭТ 154-2019 Государственный первичный эталон единиц молярной доли, массовой доли и массовой концентрации компонентов в газовых и газоконденсатных средах и ГЭТ 208-2019 Государственный первичный эталон единиц массовой (молярной) доли и массовой (молярной) концентрации органических компонентов в жидких и твердых веществах и материалах на основе жидкостной и газовой хромато-масс-спектрометрии с изотопным разбавлением и гравиметрии.

Действие методики распространяется на ранее выпущенные и вновь выпускаемые комплексы.

Интервал между поверками - 1 год.

2 ПЕРЕЧЕНЬ ОПЕРАЦИИ ПОВЕРКИ

При проведении первичной и периодической поверок выполняют операции, указанные в таблице 1.

В случае применения многоколоночных (мультидетекторных) схем поверку выполняют в соответствии с приложением А.

Поверку комплекса, имеющего в своем составе хроматограф с масс-спектрометрическим детектором (МСД), выполняют в соответствии с приложением Б.

Таблица 1 - Операции поверки

Если при проведении той или иной операции поверки получен отрицательный результат, поверка прекращается и комплексы признают не прошедшими поверку.

3 ТРЕБОВАНИЯ К УСЛОВИЯМ ПРОВЕДЕНИЯ ПОВЕРКИ

При проведении поверки должны соблюдаться следующие условия:

• - температура окружающей среды (20±5) °C;

• - относительная влажность не более 80 %;

• - атмосферное давление от 84 до 106 кПа, изменяющееся в процессе поверки не более чем на ±5 кПа;

• - напряжение переменного тока (220±5) В;

• - частота переменного тока (50±1) Гц;

• - механические воздействия, внешние электрические и магнитные поля, влияющие на работу комплекса, должны отсутствовать.

4 ТРЕБОВАНИЯ К СПЕЦИАЛИСТАМ, ОСУЩЕСТВЛЯЮЩИМ ПОВЕРКУ

• 4.1 Поверителем комплекса может быть физическое лицо - сотрудник юридического лица или индивидуального предпринимателя, аккредитованного на право выполнения работ по поверке средств измерений, проводящий поверку в порядке, установленном действующими нормативными документами в области обеспечения единства средств измерений.

• 4.2 Поверитель должен быть ознакомлен с эксплуатационными документами на поверяемый комплекс.

5 МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ И ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К СРЕДСТВАМ ПОВЕРКИ

• 5.1 При проведении поверки применяют средства поверки (приборы, оборудование, материалы и реактивы), указанные в таблице 2.

Таблица 2 - Средства поверки

Допускается использование других химически чистых веществ, для которых нормируются метрологические характеристики в соответствии с нормативными документами изготовителя (при условии наличия аналогов, находящихся в Реестре утвержденных типов стандартных образцов Российской Федерации или выпускаемых по межгосударственным стандартам).

• 5.2 При проведении поверки применяют вспомогательные материалы и оборудование, указанные в таблице 3.

Таблица 3 - Вспомогательные материалы, оборудование

5.3 Допускается использовать другие средства поверки, вспомогательные материалы и оборудование, метрологические и технические характеристики которых обеспечивают требуемую точность передачи единиц величин поверяемому комплексу.

Допускается проводить поверку комплекса только по одному из контрольных веществ, заявленных для данного детектора.

Допускается проводить поверку только на одном типе газа носителя в соответствии с газовой схемой и применением хроматографа для конкретного анализа.

6 ТРЕБОВАНИЯ ПО ОБЕСПЕЧЕНИЮ БЕЗОПАСНОСТИ ПРОВЕДЕНИЯ ПОВЕРКИ

ВНИМАНИЕ: НЕ ОЗНАКОМИВШИСЬ С УКАЗАНИЯМИ МЕР БЕЗОПАСНОСТИ, ИЗЛОЖЕННЫМИ В ДАННОМ РАЗДЕЛЕ И НИЖЕПЕРЕЧИСЛЕННЫХ ДОКУМЕНТАХ, К ПОВЕРКЕ НЕ ПРИСТУПАТЬ!

• 6.1 При проверке комплекса должны соблюдаться действующие «Правила устройства электроустановок» (ПУЭ), «Правила технической эксплуатации электроустановок потребителей» (ПТЭЭП), «Межотраслевые правила по охране труда (правила безопасности) при эксплуатации электроустановок», «Правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением», «Гигиенические требования к устройству и эксплуатации радиоизотопных приборов», «Основные санитарные правила обеспечения радиационной безопасности» (ОСПОРБ-99/2010).

• 6.2 В помещении, где проводится поверка комплекса количество горючих газов и легковоспламеняющихся веществ должно быть в количествах недостаточных для создания взрывоопасной смеси.

• 6.3 Источниками опасности комплекса являются:

• - источник бета-излучения (при наличии в составе хроматографа детектора ЭЗД);

• - токоведущие части хроматографа, находящиеся под напряжением;

• - газовые магистрали высокого давления (1,0 МПа);

• - внутренние поверхности термостатов хроматографа, имеющие высокую температуру;

• - вакуумная камера и вакуумные магистрали МСД, находящаяся под вакуумом;

• - газы-реагенты для химической ионизации МСД (метан, изобутан, аммиак);

• - газообразный водород.

• 6.4 В детектор ЭЗД установлен источник бета-излучения радионуклидный закрытый Никель-63. Детектор опломбирован навесной металлической пломбой.

ВНИМАНИЕ: ДЕТЕКТОР ЭЗД НЕ РАЗБИРАТЬ. ПЛОМБУ НЕ СРЫВАТЬ!

• 6.5 Все составные части комплекса, имеющие силовые цепи, должны быть заземлены.

• 6.6 При открытых верхней крышке и дверке термостата запрещается прикасаться руками к нагретым частям термостата, а также производить замену колонок, детекторов и т.д. до их полного остывания.

• 6.7 При работе с водородом, проведении анализов горючих, вредных и агрессивных веществ должны соблюдаться меры пожарной безопасности и правила техники безопасности, предусмотренные в специальных инструкциях, разработанных потребителем в соответствии со спецификой применяемых веществ.

• 6.8 Отбор газа из баллона должен производиться через редуктор, предназначенный для данного газа. По окончании работы вентиль на баллоне необходимо плотно закрыть.

7 ВНЕШНИЙ ОСМОТР

При внешнем осмотре устанавливают следующее:

• - соответствие комплектности комплекса и номеров блоков формуляру;

• - отсутствие вмятин и нарушения покрытия;

• - исправность механизмов и крепежных деталей;

• - четкость маркировки.

Пломбирование комплексов не предусмотрено.

Комплексы, не соответствующие вышеуказанным требованиям к дальнейшей поверке не допускают.

8 ПОДГОТОВКА К ПОВЕРКЕ И ОПРОБОВАНИЕ

• 8.1 Перед проведением поверки должны быть выполнены следующие подготовительные работы:

• - подготовлены соответствующие контрольные растворы. Инструкция по приготовлению контрольных растворов приведена в приложении В;

• - подготовлены колонки в соответствии с нормативной документацией по проведению анализа. Подготовка колонок описана в приложении Д;

• - проведена проверка герметичности газовых линий согласно указаниям руководства по эксплуатации комплекса.

При наличии нормативной документации на МВИ подготовительные работы должны быть проведены в соответствии с требованиями раздела о подготовке к проведению измерений МВИ.

• 8.2 Опробование

8.2.1 Определение уровня флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала детекторов проводится с помощью программы «Хроматэк Аналитик», согласно требованиям эксплуатационной документации. При проверке уровня шумов задается фильтрация 1 Гц.

При поверке комплексов с детекторами ДТХ используют газ-носитель гелий, ДТП -гелий или аргон, ПИД и ЭЗД - азот, ЭЗД микро - азот 6.0, при поверке других детекторов - гелий или азот. Все работы, относящиеся к поверке комплекса, выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации.

Комплекс включают, задают значения параметров поверки, согласно таблице 4.

При наличии нормативной документации на МВИ режимы поверки должны соответствовать требованиям раздела о порядке проведения измерений МВИ.

Таблица 4 - Значения параметров

Дрейф нулевого сигнала и уровень флуктуационных шумов определяют через 2 часа после задания соответствующего режима поверки.

• 8.2.2 Уровень флуктуационных шумов, с целью последующего расчета предела детектирования, определяют следующим образом.

Производят запись шумов в течение интервала времени не менее 1 минуты для каждого детектора (снимают хроматограмму без ввода пробы). Значение уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала детекторов ПИД, ПФД, ТИД, ФИД, ГИД [в амперах (А)] и детекторов ДТП (всех модификаций), ДТХ, ПРД [в вольтах (В)] определяются с помощью программы «Хроматэк Аналитик» по формуле

X If пр                                               (1)

где Д_х - максимальное значение амплитуды повторяющихся колебаний нулевого сигнала с полупериодом (длительностью импульса), не превышающим 10 с, зарегистрированное на выходе усилителя выходного сигнала детектора, при этом колебания, имеющие характер одиночных импульсов длительностью не более 1 с, не учитываются, В;

К_пр - коэффициент преобразования усилителя выходного сигнала:

к_пр = 3,9-ю⁹ В/А;

К_пр = 7,2-ю⁶ В/А;

вых

ГИД                                       1,3-10’¹⁰ А/ч.

В случае, если на хроматограмме не наблюдается увеличения дрейфа, допускается сокращать время поверки до 20 минут. При этом в ПО автоматически производится перерасчет измеренного значения дрейфа на 1 час.

Поверку дрейфа нулевого сигнала допускается совмещать с поверкой уровня флуктуационных шумов. При этом для расчета уровня шумов выбирается участок хроматограммы продолжительностью не менее 1 минуты.

Комплексы, значения дрейфа нулевого сигнала детекторов которых не соответствуют вышеуказанным требованиям, к дальнейшей поверке не допускают.

• 8.2.3 Для определения предела детектирования вводят в хроматограф пять или более раз соответствующий проверяемому детектору контрольный образец (таблица 5). Жидкие пробы вводят при помощи дозатора автоматического жидкостного или микрошприца, газовые - газовым краном-дозатором, шприцем или дозатором автоматическим газовым.

Объем вводимой жидкой пробы составляет от Г10’³ до 3 10'³ см³, объем газовой пробы составляет от 0,125 до 2,000 см³.

Значения параметров поверки и газ-носитель приведены в таблице 4.

Ввод проб выполняют, сохраняя темп ввода, время нахождения иглы в испарителе и т.д.

Определение предела детектирования допускается совмещать с определением относительного СКО.

Таблица 5 - Контрольные образцы, колонки

Предел детектирования C_min, г/с (кроме ДТП (всех модификаций) и ДТХ) рассчитывают по формуле

С ^min

(5)

о

для детекторов ДТП (всех модификаций), и ДТХ в г/см - по формуле

где G - масса контрольного вещества, г;

S - среднее арифметическое значение площади пика, В-с;

У_гн - расход газа-носителя, см³/с.

Масса контрольного компонента при использовании жидкой пробы (<7_Ж) определяется по формуле

ж 'ж н '“'о                           Р)

где У_ж - объем жидкого контрольного образца, см³;

С_н - концентрация контрольного образца, мг/см³;

Со - коэффициент учитывающий содержание:

углерода в гептане равный 0,837;

фосфора и серы в фенитротионе, равный соответственно 0,112 и 0,116;

фосфора и серы в метилпаратионе, равный соответственно 0,118 и 0,122.

При использовании других средств поверки, отличных от указанных в п. 5, коэффициенты фосфора и серы должны быть скорректированы.

В остальных случаях (для детекторов ДТП (всех модификаций), ДТХ, ЭЗД) коэффициент принимается равным единице.

При использовании газовой пробы масса контрольного вещества (G_s) определяется по формуле

_{G =v} 0,01Р-М-С_г-С₀ ^{г г} R(T + 273)

где У_г - объем газовой пробы, см³;

Р - атмосферное давление, Па;

М - молекулярная масса для: пропана М = 44 г/моль, сероводорода М = 34 г/моль, водорода М = 2 г/моль;

метана М - 16 г/моль

Со - коэффициент, учитывающий содержание серы в сероводороде, равный 0,941.

В остальных случаях коэффициент принимается равным единице.

С_г - объемная доля контрольного вещества в газовой смеси, %;

R - газовая постоянная, R = 8,3 -10⁶;

Т - температура окружающей среды, °C.

Предел детектирования C_min , % определяют по формуле

2-С А

z-л —       ^{1     х}

^min        г     ’

(9) где С _min - предел детектирования по компонентам газовых смесей, %;

С, - концентрация (объемная доля) i-ro компонента в контрольном веществе, %;

h_t - средняя высота пика компонента на хроматограмме, В.

Допускается проводить определение флуктуационных шумов, предела детектирования и относительного СКО при установленной в хроматограф капиллярной колонке. Следует учитывать, что объем вводимой в колонку пробы (масса контрольного компонента) будет в Кдп раз меньше объема пробы (массы компонента) вводимого компонента.

Предел детектирования рассчитывается с учетом коэффициента деления пробы.

^Кдп (10) где G_u - масса контрольного компонента, вводимого в испаритель, г;

Кдп ~ коэффициент деления пробы.

Коэффициент Кдп для ручного расчета равен

V

К,=1 + ^-^дп у

(И) где Vk ~ расход газа-носителя через капиллярную колонку, см³/мин;

Уев - расход газа-носителя на сброс пробы, см³/мин.

Коэффициент К_дп рассчитывается с помощью программы «Хроматэк Аналитик» в зависимости от параметров колонки (длины, диаметра), давления (скорости, расхода) газа-носителя на входе в капиллярную колонку.

Полученные значения предела детектирования должны быть не более:

Комплексы, значение предела детектирования детекторов которых не соответствуют вышеуказанным требованиям, к дальнейшей поверке не допускают.

9 ПРОВЕРКА ПРОГРАММНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ

• 9.1 В комплексах возможно применение двух версий ПО, идентификационные данные которых приведены в таблице 6.

Таблица 6 - Идентификационные данные программного обеспечения

С помощью программы MS Windows «Проводник» находят в папке установки ПО «Хроматэк Аналитик» файл AnlCheckup.dll (или Analytic3Core.dll) и открывают диалог «Свойства файла».

• - Файл AnlCheckup.dll должен иметь версию 2.6.0.9 и выше

• - Файл Analytic3Core.dll должен иметь версию 3.0.0.2 и выше

• 9.2 Определение хэш-кода файла метрологически значимого модуля ПО.

На установочном диске с ПО «Хроматэк Аналитик» входят в папку «Utils» и запускают программу md5summer.exe. Выбирают папку, в которую было установлено ПО «Хроматэк Аналитик» (см. документ Программное обеспечение «Хроматэк Аналитик». Руководство пользователя 214.00045-51И). Нажимают «Create sums». Выбирают файл AnlCheckup.dll (для «Хроматэк Аналитик» версии 2.6.0.9 и выше) или Analytic3Core.dll (для «Хроматэк Аналитик» версии 3.0.0.2 и выше). Нажимают «Add». Нажимают «ОК». Сохраняют под любым именем файл с расширением *.md5.

Открывают с помощью программы блокнота сохраненный файл с расширением *.md5 и сравнивают приведенный там хэш-код, со значением, указанным в таблице 8.

• 10 ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТРОЛОГИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК И ПОДТВЕРЖДЕНИЕ СООТВЕТСТВИЯ КОМПЛЕКСА МЕТРОЛОГИЧЕСКИМ ТРЕБОВАНИЯМ

  • 10.1 Относительное СКО выходного сигнала определяют с помощью программы «Хроматэк Аналитик» при условиях, указанных в таблице 4, с применением контрольных образцов, приведенных в таблице 5. Одновременно допускается выполнять определение предела детектирования.

Относительное СКО выходного сигнала определяют для всех информативных параметров выходного сигнала, для которых эта характеристика нормирована (времени удерживания (t), высоты (h) или площади пика (s)).

Вводят в хроматограф пять или более раз контрольный образец, соответствующий поверяемому детектору. С помощью ПО определяют значения выходного сигнала (/_;,/г,,S,), находят их средние арифметические значения (/, h, s).

Значение относительного СКО a,, cr_h, tx_s, % определяют по формулам:

(12)

• (13)

• (14)

где п - число результатов измерений, полученное после исключения анормальных результатов.

Для определения анормальных результатов рассчитывают среднее квадратическое отклонение информативных параметров выходного сигналах (t, h, s) по формуле

t(y, -У)²

(15)

где у — среднее арифметическое значение информативного параметра выходного сигнала.

Находят отношение для подозреваемого в анормальности результата наблюдений U_t по формуле

(16)

Полученный результат сравнивают с величиной 0 из таблицы 7 для данного объема выборки.

Таблица 7 — Предельные значения 0

Продолжение таблицы 7

Если [/,. > Д, то результат наблюдения анормален и его исключают из серии измерений.

Полученные значения относительного СКО должны быть не более, указанных в таблице 8.

Таблица 8 - Относительное СКО выходного сигнала

Комплексы, значение относительного СКО выходного сигнала которых не соответствуют вышеуказанным требованиям, к дальнейшей поверке не допускают.

• 10.2 Определение относительного изменения выходного сигнала комплекса за 48 часов непрерывной работы проводят следующим образом.

Выполняют операции по п. 10.1 и определяют средние арифметические значения информативных параметров выходного сигнала x(t, h, S').

Через 48 часов непрерывной работы комплекса снова проводят измерения по п. 10.1 и определяют средние арифметические значения параметров Xt(tt, h_t, St\

Относительное изменение параметров выходного сигнала (времени удерживания, высоты, и площади пика) 8_t, %, за 48 часов непрерывной работы определяют по формуле

Полученные значения относительного изменения параметров выходного сигнала за 48 часов непрерывной работы комплекса 8,, должны быть не более:

ПИД

ПФД

ДТП (все модификации)

ДТХ

ЭЗД (все модификации)

ФИД

ПРД

Допускается сокращать время непрерывной работы комплекса до 8 часов.

• 10.3 Определение показателей точности результатов измерений, установленных в НД на методику измерений, проводят в условиях и на образцах для контроля, указанных в НД на МВИ.

Задают значения параметров хроматографа, установленные в НД на МВИ. Вводят в хроматограф контрольный образец, указанный в методике измерений.

Полученный результат измерения (С) должен удовлетворять условию: где Сд - действительное значение содержания компонента в контрольном образце;

К - норматив оперативного контроля точности, указанный в МВИ.

11 ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ПОВЕРКИ

• 11.1 Сведения о результатах поверки (как положительные, так и отрицательные) передаются в Федеральный информационный фонд по обеспечению единства измерений.

• 11.2 Положительные результаты первичной поверки комплекса оформляют записью в формуляре комплекса, удостоверенной подписью и клеймом поверителя. К формуляру прилагают хроматограммы с указанием значений параметров режима, полученные при поверке.

• 11.3 Результаты периодической поверки комплекса заносят в протокол поверки по форме, рекомендуемой в приложении Г. Возможно оформление протокола поверки в произвольной форме с указанием всех характеристик, рекомендуемых формой протокола, приведенного в Приложении Г.

• 11.4 При положительных результатах поверки дополнительно по заявлению владельца средства измерений или лица, предоставившего его на поверку, выдается свидетельство о поверке на бумажном носителе. Знак поверки в виде оттиска клейма и (или) наклейки наносится на свидетельство о поверке.

• 11.5 При отрицательных результатах поверки дополнительно по заявлению владельца средства измерений или лица, предоставившего его на поверку выдается извещение о непригодности к применению.

ГИД- гелиевый ионизационный детектор;

ДТП- детектор по теплопроводности;

ДТХ- детектор термохимический;

ПИД- пламенно-ионизационный детектор;

ПРД- пульсирующий разрядный детектор;

ПФД- пламенно-фотометрический детектор;

ТИД- термоионный детектор;

ФИД- фотоионизационный детектор;

ЭЗД- электронозахватный детектор;

МСД- масс-спектрометрический детектор;

СО- стандартный образец;

КД- конструкторская документация;

НД- нормативная документация;

МВИ- методика выполнения измерений;

ПК- персональный компьютер;

ПО- программное обеспечение;

СКО- среднее квадратическое отклонение;

РЭ- руководство по эксплуатации.

ТУ - технические условия;

ТДС - термодесорбер;

ПГС - поверочная газовая смесь;

ЭД - эксплуатационная документация.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

(рекомендуемое)

Операции поверки, режимы и средства поверки при специальных анализах

Специальными являются анализы при проведении которых применяется газовая схема комплекса, собранная на предприятии-изготовителе и предназначенная для определенного анализа в соответствии с нормативной документацией (ГОСТ, РД, МУ, ТУ, МВИ и др.).

К специальным анализам относятся:

• 1) анализ многокомпонентных смесей - проводится при одновременном вводе пробы (последовательно или параллельно) в две (или более) хроматографические колонки (при необходимости разделения компонентов пробы на нескольких хроматографических колонках);

• 2) анализ методом реакционной хроматографии - проводится при преобразовании веществ разделенных хроматографической колонкой каталитическим реактором - метана-тором.

• 1 Опробование

  • 1.1 Уровень флуктуационных шумов и дрейф нулевого сигнала комплексов, предназначенных для специальных анализов, определяют по формулам, приведенным в п.п. 6.2.1, 6.2.2 настоящей методики.

  • 1.2 Уровень флуктуационных шумов и дрейф нулевого сигнала детектора ПИД в составе комплексов, предназначенных для проведения специальных анализов (методом реакционной хроматографии), определяются с метанатором, работающим при пониженной температуре и их измеренные значения не должны превышать указанных в п. 6.2.1 и 6.2.2 настоящей методики.

В протокол поверки комплекса вносится уровень флуктуационных шумов и дрейф нулевого сигнала детектора ПИД с метанатором, работающим при пониженной температуре.

• 1.3 Для определения предела детектирования детектора ПИД с метанатором вводится проба в соответствии с таблицей А2 приложения А. Максимальное значение амплитуды повторяющихся колебаний нулевого сигнала определяется при рабочей температуре метанатора. Предел детектирования рассчитывается по формуле 9 настоящей методики поверки.

Предел детектирования детектора ПИД с метанатором должен быть не более Г10"⁴ % об. доля оксида углерода или диоксида углерода.

В протокол поверки хроматографа вносится шум и дрейф детектора ПИД при пониженной температуре метанатора, значение предела детектирования детектора ПИД с метанатором, при рабочей температуре метанатора и значение рабочей температуры метанатора.

• 2 Определение метрологических характеристик

  • 2.1 Метрологические характеристики: относительное СКО выходного сигнала, изменение выходного сигнала за 48 часов непрерывной работы комплекса определяют в соответствии с подразделами 6.3.1 и 6.3.2 настоящей методики поверки.

Допускается уменьшать время непрерывной работы до 8 часов.

• 2.2 Определение показателей точности результатов измерений, установленных в НД на методику измерений определяется согласно п. 6.3.3 настоящей методики поверки.

• 3 Режимы поверки

  • 3.1 Для определения предела детектирования вводят в хроматограф пять или более раз соответствующий проверяемому детектору контрольный образец, в соответствии с таблицей 5 настоящей методики или таблицей А2 приложения А. Все действия и расчеты выполняют согласно подразделу 6.2.3 настоящей методики.

Время переключения колонок, режимы анализа для хроматографов с переключением колонок приводятся в хроматограммах, полученных при проведении первичной поверки на предприятии-изготовителе

Режимы поверки приведены в таблице А2 приложения А.

• 3.2 Режимы поверки при программировании температуры термостата колонок приведены в таблице А1.

Таблица А1 - Режимы поверки при программировании температуры термостата колонок

В режиме программирования термостата колонок на хроматограмме не должно быть пиков, мешающих определению компонентов контрольных образцов.

• 4 Дополнительные средства поверки

  • 4.1 Дополнительные средства поверки комплексов, предназначенных для специальных анализов, и режимы поверки приведены в таблице А2.

Таблица А2 - Дополнительные средства и значения параметров поверки комплексов для специальных анализов

ем-изготовителем с комплексом, обеспечивающих требуемое разделение поверочных смесей. Хроматографические колонки должны иметь паспорт с обязательным приложением хроматограммы снятой на данной колонке. Допускается проводить поверку на капиллярных колонках с учетом указаний, приведенных в соответствующих разделах настоящей методики.

***Указаны рабочая температура метанатора и температура метанатора при определении уровня флуктуационных шумов (в скобках).

• 4.2 Эффективность колонок, указываемая в паспорте на колонку, рассчитывается по формуле

N = 5,545 •(—У IL,

^а (1)

где N - эффективность колонки, тт/м;

t_yd - время удерживания, с;

а - ширина пика на половине его высоты, с;

L - длина колонки, м

• 4.3 При наличии нормативной документации на МВИ режимы поверки должны соответствовать требованиям раздела о порядке проведения измерений МВИ. В соответствующем разделе протокола поверки комплекса указываются данные о режимах поверки, хроматографических колонках и контрольном образце.

Перечень компонентов, значения и единицы измерения предела детектирования, метрологические характеристики по компонентам, не указанным в данной методике поверки, должны соответствовать значениям, указанным в нормативной документации (ГОСТ, РД, МУ, ТУ, МВИ и т.д.) на проведение анализа.

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

(обязательное) Операции, режимы и средства поверки хроматографа с масс-спектрометрическим детектором

• 1 ОПЕРАЦИИ ПОВЕРКИ

1.1В данном приложении указаны операции, режимы и средства поверки комплекса в составе: хроматограф «Хроматэк - Кристалл 5000» с детектором МСД.

• 1.2 При поверке все подключения, задание режимов работы выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации на комплекс и руководством по эксплуатации на МСД.

• 1.3 При проведении первичной и периодической поверок выполняют операции, указанные в таблице Б1.

Таблица Б1 - Операции поверки

¹ При отсутствии утвержденной в установленном порядке НД на МВИ

1.4. Допускается изменение приведенных в таблице Б1 последовательности операций проверки.

1.5 Требования к квалификации поверителей приведены в разделе 3, требования безопасности приведены в разделе 4, условия поверки и подготовка к ней приведены в разделе 5 настоящей методики. Отклонение температуры окружающей среды во время поверки МСД должно быть не более чем ±1 °C.

• 2 СРЕДСТВА ПОВЕРКИ

• 2.1 Средства поверки для комплекса с масс-спектрометрическим детектором МСД приведены в таблице Б2.

Таблица Б2 - Средства поверки для комплекса с МСД

• 2.2 При проведении поверки применяют вспомогательные материалы и оборудование, указанные в таблице БЗ.

Таблица БЗ - Вспомогательные материалы, оборудование

При наличии нормативной документации на МВИ технические характеристики колонок должны соответствовать требованиям раздела о средствах измерений МВИ. Допускается проводить поверку на капиллярных колонках с учетом указаний, приведенных в соответствующих разделах настоящей методики

• 2.3 Допускается использовать другие средства поверки, вспомогательные материалы и оборудование, метрологические и технические характеристики которых соответствуют указанным в настоящей инструкции

• 3 ПРОВЕДЕНИЕ ПОВЕРКИ

• 3.1 Внешний осмотр

При внешнем осмотре устанавливают следующее:

• - соответствие комплектности комплекса и номеров блоков формуляру;

• - отсутствие вмятин и нарушения покрытия;

• - исправность механизмов и крепежных деталей;

• - четкость маркировки

Комплексы, не соответствующие вышеуказанным требованиям к дальнейшей поверке не допускают.

• 3.2 Опробование - определение предела детектирования (чувствительности) по гексахлорбензолу.

• 3.2.1 Для определения предела детектирования по гексахлорбензолу устанавливают значения параметров хроматографа и МСД, приведенные в таблице Б4.

Таблица Б4- Значения параметров

вовать требованиям раздела о порядке проведения измерений МВИ. В хроматограммах поверки указываются данные о режимах поверки, хроматографических колонках и контрольном образце.

• 3.2.2 Вводят в испаритель хроматографа с помощью микрошприца 1,0-10'³ см³ гексахлорбензола концентрацией 1,0-10‘⁵ мг/см³ в изооктане не менее пяти раз. Допускается применять раствор гексахлорбензола концентрацией 1,0-10’⁶ или 1,0-10^-4 мг/см³.

• 3.2.3 С помощью программного обеспечения МСД определяют отношение сиг-нал/шум для гексахлорбензола по хроматограмме иона с M/Z 284 а.е.м. или 286 а.е.м.

• 3.2.4 Полученное значение отношения сигнал/шум должно быть не менее 1500:1.

• 3.2.5 Значение отношения сигнал/шум, измеренное при периодической поверке, может отличаться от значения, измеренного при первичной поверке, но не более чем в 5 раз.

3.3 Определение метрологических характеристик

• 3.3.1 Определение относительного СКО параметров выходного сигнала.

При поверке применяют контрольные образцы, приведенные в таблице Б2.

Устанавливают режимы работы хроматографа и МСД, приведенные в таблице Б4. При определении метрологических характеристик по гексахлорбензолу допускается применять режим ввода пробы «с делением потока».

В испаритель хроматографа с помощью микрошприца вводят 1,0-10’³ см³ раствора гексахлорбензола в изооктане концентрацией от 1,0 -10"⁴ до 1,0-10'³ мг/см³ не менее 5 раз.

С помощью программного обеспечения МСД для каждого ввода контрольной смеси определяют время удерживания и площадь пика Xi для гексахлорбензола на хроматограмме иона с M/Z 284 а.е.м. или 286 а.е.м.

Вычисляют среднее арифметическое значение параметров выходного сигнала Х\ времени удерживания, площади пика.

Относительное СКО параметров выходного сигнала рассчитывают согласно п. 6.3.1 настоящей методики.

Полученное значение относительного СКО площади пика при ручном дозировании не должно превышать 5 %, а времени удерживания 2%.

Полученное значение относительного СКО площади пика при дозировании с помощью автоматического дозатора не должно превышать 4 %, а времени удерживания 0,4 %.

• 3.4.2 Определение относительного изменения параметров выходного сигнала за 8 часов непрерывной работы.

Проводят операции по п. 3.3.1 приложения Б.

Через 8 часов непрерывной работы повторяют операции по п. 3.3.1 приложения Б. Относительные изменения параметров выходного сигнала за 8 часов непрерывной работы рассчитывают согласно п. 6.3.2. настоящей методики.

Полученные значения относительного изменения параметров выходного сигнала не должны превышать ±5 %.

ПРИЛОЖЕНИЕ В

(рекомендуемое) Инструкция по приготовлению контрольных растворов

Настоящая инструкция устанавливает методику приготовления контрольных растворов, предназначенных для контроля метрологических характеристик комплекса.

Диапазон содержания компонента в контрольном образце должен быть от 110'⁶ до 10 мг/см³. Относительная погрешность массовой концентрации контрольного компонента не превышает 10 %.

Средства измерений, материалы и реактивы приведены в разделе 5 настоящей методики поверки.

1 Процедура приготовления растворов

• 1.1 Растворы с массовой концентрацией в диапазоне от 1 до 10 мг/см³ готовят объемно - весовым методом. Массовую концентрацию контрольного компонента (Ci) определяют по формуле

т

Г* — I

^ео "

^v                                           (В.1)

где от, - масса контрольного компонента, мг;

v - объем приготовленного раствора, см³.

• 1.2 Исходные вещества, используемые для приготовления раствора, выдерживают не менее 2 ч в лабораторном помещении.

• 1.3 Температура окружающей среды при приготовлении контрольных растворов не должна изменяться более, чем на 4 °C.

• 1.4 Определяют массу (mi) мерной колбы вместимостью 100 см³. Результат взвешивания записывают до первого десятичного знака.

• 1.5 В мерную колбу вносят от 100 до 1000 мг контрольного компонента и вновь взвешивают колбу (m2).

• 1.6 Вычисляют массу контрольного компонента (т) в мг

W = ^₂-Wi                       _(В2)

• 1.7 В колбу с контрольным компонентом вводят от 20 до 25 см³ растворителя, перемешивают содержимое и доводят объем раствора до 100 см³. Тщательно перемешивают раствор.

• 1.8 Рассчитывают массовую концентрацию контрольного компонента по формуле В.1.

• 1.9 Растворы с содержанием контрольного компонента от 110‘⁶ мг/см³ до 1 мг/см³ готовят объемным методом путем последовательного разбавления более концентрированных растворов. Массовую концентрацию контрольного компонента рассчитывают по формулам

  С ■ V с, =    0    1 1 100	(В.З)
  С ■ V С 2 = —--- 2 100	(В.4)
  С ■ V fl _ ил-1 ' п ” 100	(В.5)

где п - номер ступени разбавления исходного контрольного раствора с концентрацией Со-Vi, V2, V_n - аликвотная доля раствора с концентрацией Со, С], C_n.i, соответственно, мг/см³,

• 1.10 Перед каждым разбавлением рассчитывают значение аликвотной доли раствора (Vi, V2, V_n), исходя из заданного значения концентрации контрольного компонента (Со, Ci, Сп-1) и концентрации разбавляемого раствора.

1.11В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят аликвотную долю разбавляемого раствора, доводят объем приготавливаемого раствора до 100 см³ и тщательно перемешивают.

• 1.12 Для уменьшения предела возможных значений погрешности приготовления контрольных растворов рекомендуется использовать мерные колбы вместимостью более 100 см³, а объем отбираемой аликвотной доли не менее 1 см³.

• 1.13 Для уменьшения предела возможных значений погрешности приготовления контрольных растворов при взвешивании в диапазоне 10 мг рекомендуется использовать весы погрешностью взвешивания не хуже 0,0005 г.

2 Хранение контрольных растворов

• 2.1 Контрольный раствор хранят в чистых сухих склянках с хорошо притертыми пробками, вдали от источников огня и нагревательных приборов при температуре от 4 до 8 °C.

Срок хранения исходного раствора от 3 до 5 дней (если иное не заявлено в паспорте на ГСО или в МВИ), смеси меньших концентраций хранению не подлежат.

ПРИЛОЖЕНИЕ Г

(рекомендуемое) Форма протокола поверки хроматографа

Протокол №________

поверки комплекса аппаратно-программного для медицинских исследований на базе хроматографа «Хроматэк - Кристалл 5000», принадлежащего

наименование организации

Изготовитель____________________________________________________________________

Год изготовления________________________________________________________________

Порядковый номер по системе нумерации изготовителя_____________________________

Наименование и номера блоков__________________________________________________

Условия поверки

температура окружающего воздуха_________________К (°C)

атмосферное давление____________________________кПа

относительная влажность__________________________%

напряжение питания_____________________________В

1 Определение уровня флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала

2 Определение предела детектирования

3 Определение относительного СКО выходного сигнала

4 Определение относительного изменения выходного сигнала за 48 ч (для МСД -8 ч) непрерывной работы

5 Определение погрешности результатов измерений

• 6 Особые отметки (пробы, режимы, колонки и др.)

• 7 Приложение (хроматограммы, полученные при поверке)

Заключение по результатам поверки______________________________________________

Выдано свидетельство (извещение о непригодности)

Поверку проводил_________________________

подпись

«_____»___________________20_____г.

ПРИЛОЖЕНИЕ Д

(рекомендуемое) Подготовка хроматографических колонок

Комплекс поставляется с заполненными и протестированными колонками. При необходимости заполнения колонок пользователем самостоятельно, рекомендуется следующая типовая последовательность действий.

Продуть колонку газом-носителем при давлении (0,2-0,3) МПа от баллона с редуктором, закрывая и открывая свободный конец колонки.

Промыть колонку и просушить:

• • Заполнить колонку раствором технического моющего средства (ТМС) «Лабомид-102» ТУ 2149-051-10968286-97 в воде, поместить в ультразвуковую ванну и промыть с использованием ультразвука, одновременно прокачивая через колонку раствор ТМС.

• • Промыть колонку от ТМС горячей водой в объеме до 40 объемов колонки.

• • Промыть колонку слабым раствором (5 %) соляной кислоты (3-4 объема колонки) для нейтрализации остатков ТМС.

• • Промыть колонку холодной водой.

• • Промыть колонку дистиллированной водой.

• • Продуть колонку от воды воздухом от компрессора.

• • Просушить колонку в сушильном шкафу при температуре 150 °C не менее 2 часов.

• • Охладить колонку.

  

Перед заполнением колонки:

• Конец колонки, подключаемый к вакуумному насосу, уплотнить стекловолокном или стекловатой.

• Рассчитать количество сорбента, необходимое для заполнения колонки по формуле V=(3,14-D²_K(M-L_KCWI)/4,

где V - объем сорбента (см³),

Экол - внутренний диаметр колонки (см),

Ь_кол - длина колонки (см).

Оптимальное отношение внутреннего диаметра колонки к диаметру частиц сорбента составляет 8-10 раз.

Заполнить колонки сорбентом при легком постукивании (или вибрации) по колонке, обеспечивая равномерную набивку колонки.

Не отключая вакуумного насоса, уплотнить свободный конец колонки стекловолокном или стекловатой.

Заполненные колонки установить в термостат хроматографа, не подключая к детекторам.

Кондиционировать колонки в потоке газа-носителя с расходом (15-20) см³/мин в течение 8 ч при температурах, указанных в сопроводительной документации для соответствующих неподвижных фаз или адсорбентов.

При температуре кондиционирования свыше 250 °C колонки подключать с использованием графитового уплотнения.

Форма паспорта на колонку хроматографическую насадочную

КОЛОНКА НАСАДОЧНАЯ

Паспорт

• 1 ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

  Материал

  Длина, м

  Носитель, фракция

  Адсорбент, фракция

  Партия сорбента, №

  Т шах, °C

  Время, ч

  Эффективность, тт/м

  Проба

  
  

  0 внутренний

  колонки, мм

  0 наружный (присоединительный), мм

  

  	Фаза Т max, °C

  Кондиционирование:

  	Газ-носитель Расход, см3/мин
  	Детектор Расход Г-Н, см3/мин

  

• 2 СВИДЕТЕЛЬСТВО О ПРИЕМКЕ

Колонка хроматографическая насадочная зав. №________________изготовлена и принята

в соответствии с требованиями технической документации_______________

___________________________________________и признана годной для эксплуатации.

МП

• 3 ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ

3.1 Гарантийный срок эксплуатации три месяца со дня ввода в эксплуатацию при средней интенсивности эксплуатации 8 ч в сутки, но не более 12 месяцев со дня приемки.

ВНИМАНИЕ: ВХОД КОЛОНКИ ОБОЗНАЧЕН БИРКОЙ С УКАЗАНИЕМ НОСИТЕЛЯ С НЕПОДВИЖНОЙ ЖИДКОЙ ФАЗОЙ (ИЛИ АДСОРБЕНТА), ДИАМЕТРА ФРАКЦИИ, ДАТЫ.

36