Методика поверки «Хромато-масс-спектрометры жидкостные LCMS-9030» (МП 205-07-2020)

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель директора

Иванникова

2020 г.

Хромато-масс-спектрометры жидкостные LCMS-9030

Методика поверки

МП 205-07-2020

г. Москва 2020 г.

Настоящая методика распространяется на хромато-масс-спектрометры жидкостные LCMS-9030 (далее - хромато-масс-спектрометры), разработанные и изготовленные фирмой "SHIMADZU CORPORATION”, Япония, фирмой "SHIMADZU U.S.A.MANUFACTURING, INC.”, США, и устанавливает методику их первичной и периодической поверок.

Допускается проводить:

• - первичную поверку хромато-масс-спектрометров жидкостных LCMS-9030 с детекторами, входящими в комплект хроматографа, в соответствии с заказом;

• - периодическую поверку хромато-масс-спектрометров жидкостных LCMS-9030 на основании письменного заявления владельца с детектором (-ами), с которым (-и) хроматограф эксплуатируется;

• - применять для поверки масс-спектрометрического детектора контрольные растворы левомицетина или резерпина (по выбору).

Интервал между поверками - 1 год.

1 ОПЕРАЦИИ ПОВЕРКИ

1.1 При проведении поверки выполняют операции, указанные в таблице 1. Таблица 1

Примечания:

^!) При отсутствии НД на методики измерений (МИ), утвержденных в установленном

2 СРЕДСТВА ПОВЕРКИ

При проведении поверки применяют следующие средства поверки.

• 2.1 ГСО 10165-12 состава левомицетина.

• 2.2 Резерпин, ФС № 423267-96 или резерпин с содержанием основного вещества не менее 99,0, CAS 50-55-5.

• 2.3 Кофеин, ФС 42-0248-07 или кофеин с содержанием основного вещества не менее 98%.

• 2.4 Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, ТУ 6-09-14-2167-84.

• 2.5 Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная), ГОСТ Р 52501-2005.

• 2.6 Азот газообразный очищенный, ГОСТ 9293-74, высший сорт.

• 2.7 Аргон, ГОСТ 10157-2016.

• 2.8 Колонка для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), применимая для варианта обращенно-фазовой ВЭЖХ, например, Shim-pack VP-ODS (150 мм х 2,0 мм, средний размер частиц 5 мкм), Shim-pack XR-ODS III (50 мм х 2,0 мм) или Shim-pack XR-ODSII (50 мм х 2,0 мм).

• 2.9 Термометр типа ТЛ4 № 2 по ГОСТ 215-73.

• 2.10 Психрометр типа ПГ-1БМ по ГОСТ 6353-85.

• 2.11 Барометр-анероид БАММ-1 по ТУ 25-04-1618-72.

Допускается применение аналогичных средств поверки, обеспечивающих определение метрологических характеристик поверяемых СИ с требуемой точностью.

3 УСЛОВИЯ ПОВЕРКИ И ПОДГОТОВКА К НЕЙ

• 3.1 При проведении поверки соблюдают следующие условия:

  • - температура окружающего воздуха, °C                                  от 18 до 28

  • - относительная влажность, %                                           от 20 до 70

  • - атмосферное давление, кПа                                                101,3 ± 4

  • - напряжение питания, В                                                  230 ± 6

  • - частота напряжения питания, Гц                                           50 ± 1

• 3.2 Подготовительные работы выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации хромато-масс-спектрометра.

• 3.3 Перед проведением поверки готовят контрольные растворы (методика приготовление контрольных растворов приведена в Приложении 1).

4 ПРОВЕДЕНИЕ ПОВЕРКИ

• 4.1 Внешний осмотр

При внешнем осмотре устанавливают:

• - соответствие комплектности хромато-масс-спектрометра требованиям технической документации;

• - четкость маркировки;

• - исправность механизмов и крепежных деталей;

• - отсутствие внешних повреждений, влияющих на работоспособность хромато-масс-спектрометров.

• 4.2 Опробование

При опробовании определяют отношение сигнал/шум масс-спектрометрического детектора, уровень флуктуационных шумов и дрейф нулевого сигнала, предел детектирования спектрофотометрических и спектрофотометрических диодноматричных детекторов.

• 4.2.1 Определение отношения сигнал/шум хромато-масс-спектрометров жидкостных LCMS-9030.

При определении отношения сигнал/шум хроматографическую колонку заменяют капилляром (материал РЕЕК) длиной (30 - 50) см и внутренним диаметром 0,13 мм. Капилляр устанавливают между автодозатором SIL и масс-спектрометром.

Отношение сигнал/шум определяют с использованием контрольных растворов и при условиях, указанных в таблице 2.

Таблица 2

• 4.2.1.1 В хромато-масс-спектрометр вводят пробу контрольного раствора. Находят значение отношения сигнал/шум (S/N) левомицетина для перехода m/z 321,1>152,0 или резерпина для перехода m/z 609,3> 195,1 (точные значения масс ионов-продуктов устанавливают, исходя из отображаемых значений в масс-спектре).

Значения отношения сигнал/шум рассчитывают с помощью программного обеспечения "LabSolutions LCMS".

Значение S/N должно быть не менее соотношения 3000:1.

• 4.2.2 Определение дрейфа и уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала спектрофотометрических SPD-20A/SPD-20AV и спектрофотометрических на диодной матрице SPD-M20A/SPD-M30A детекторов. Измерения проводят при условиях, указанных в таблице 3. Таблица 3

  Наименование детектора	Элюент	Скорость потока элюента, мл/мин	Параметры детектора
  Спектрофотометрические SPD-20A/SPD-20AV. Спектрофотометрические на диодной матрице SPD-M20A/SPD-M30A.	Вода	1	Длина волны 250 нм Постоянная времени 2 с

При определении уровня флуктуационных шумов и дрейфа нулевого сигнала спектрофотометрических детекторов SPD-20A/SPD-20AV и спектрофотометрических диодноматричных детекторов SPD-M20A/SPD-M30A хроматографическую колонку заменяют на стальной или полиэтиленовый капилляр (сталь марки 316 или материал РЕЕК) длиной 30-50 см и внутренним диаметром (0,1-0,3) мм.

Нулевой сигнал регистрируется на самом чувствительном диапазоне в течение 1 часа.

Дрейф рассчитывают, как максимальное значение одностороннего смещения нулевой линии в течение 1 часа.

За уровень флуктуационных шумов принимают максимальную амплитуду повторяющихся колебаний нулевого сигнала с периодом не более 20с при непрерывной записи в течение 15 мин.

• 4.2.3 Определение предела детектирования

Предел детектирования определяют при условиях, указанных в таблице 4.

Таблица 4

В хроматограф вводят пробу контрольного вещества, определяют высоту (h) и ширину пика на половине его высоты или площадь пика (S).

Предел детектирования рассчитывают по формуле

где G - масса введенного контрольного вещества; G = С -V;

С - массовая концентрация контрольного вещества (кофеина), мг/дм³;

• V - объем введенной пробы, мкл;

• V - скорость потока элюента, см³/мин.

• 4.3 Определение метрологических характеристик

  • 4.3.1 Определение относительного среднего квадратического отклонения (СКО) выходного сигнала хромато-масс-спектрометров жидкостных LCMS-9030 с масс-спектрометрическим, спектрофотометрическими детекторами и спектрофотометрическими детекторами на диодной матрице

Измерения проводят после выхода хромато-масс-спектрометров на режим. Элюент, колонка и контрольные вещества указаны в таблицах 2,4.

На вход прибора подают не менее 6 раз контрольный раствор и измеряют значения площади пика контрольного вещества.

Значения относительного СКО выходного сигнала (площади пика (сг₅) и времени удерживания (ст,)) рассчитывают по формулам

9

где SjSj - среднее арифметическое и i-тое измеренное значение площади пика соответственно;

Z, - среднее арифметическое и i-тое измеренное значение времени удерживания; п - число измерений, п > 6.

Полученные значения относительного среднего квадратического отклонения выходного сигнала не должны превышать значений, приведенных в таблице 5.

Таблица 5

• 4.3.2 При проведении периодической поверки хроматографов, эксплуатируемых по НД на МИ, отвечающим требованиям ГОСТ Р 8.563-2009, проверяют показатели точности результатов измерений в соответствии с процедурами и нормативами контроля, регламентированными в НД на МИ.

5 ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ПОВЕРКИ

• 5.1 Результаты поверки хромато-масс-спектрометров заносят в протокол произвольной формы.

• 5.2 Положительные результаты поверки хромато-масс-спектрометров оформляют выдачей свидетельства в соответствии с Порядком проведения поверки средств измерений, требования к знаку поверки и содержанию свидетельства о поверке (утв. приказом Минпромторга России № 1815 от 02.07.2015 г.).

• 5.3 Знак поверки наносят на боковую поверхность хромато-масс-спектрометра в виде наклейки.

• 5.4 На хромато-масс-спектрометры, не удовлетворяющие требованиям настоящей методики поверки, выдают извещение о непригодности с указанием причин в соответствии с Порядком проведения поверки средств измерений, требования к знаку поверки и содержанию свидетельства о поверке (утв. приказом Минпромторга России № 1815 от 02.07.2015 г.)

Начальник сектора ФГУП "ВНИИМС", к.х.н.

ПРИЛОЖЕНИЕ 1

МЕТОДИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОНТРОЛЬНЫХ РАСТВОРОВ

• 1 СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ПОСУДА, РЕАКТИВЫ

  • 1.1 ГСО 10165-12 состава левомицетина.

  • 1.2 Резерпин, ФС № 423267-96 или резерпин с содержанием основного вещества не менее 99,0, CAS 50-55-5.

  • 1.3 Кофеин, ФС 42-0248-07 или кофеин с содержанием основного вещества не менее 98%.

  • 1.4 Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1-2011, класс точности I (специальный), поверочный интервал 1 мг.

  • 1.5 Колбы мерные наливные 2-100-2, 2-200-2, 2-1000-2, ГОСТ 1770-74.

  • 1.6 Пипетки с одной отметкой 1-2-1,1-2-25, ГОСТ 29169-91

  • 1.7 Стаканы В-1-50ТС, ГОСТ 25336-82.

  • 1.8 Вода для лабораторного анализа, ГОСТ Р 52501-2005.

  • 1.9 Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.

• 2 ПРОЦЕДУРА ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОНТРОЛЬНОГО РАСТВОРА РЕЗЕРПИНА

• 2.1. Приготовление исходного раствора резерпина с массовой концентрацией 10 мг/дм³

Взвешивают в стакане 10,0 мг резерпина, добавляют 25 см³ ацетонитрила, перемешивают. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³. Ополаскивают стакан ацетонитрилом, раствор переносят в мерную колбу, доводят до метки ацетонитрилом, перемешивают.

• 2.2 Приготовление раствора резерпина с массовой концентрацией 0,1 мг/дм³

1 см³ раствора, приготовленного по п. 2.1, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки ацетонитрилом.

• 2.3 Приготовление контрольного раствора резерпина с массовой концентрацией 0,001 мг/дм

1 см³ раствора, приготовленного по п. 2.2, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки ацетонитрилом.

Погрешность приготовления контрольного раствора ±5 %.

• 3 ПРОЦЕДУРА ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОНТРОЛЬНОГО РАСТВОРА ЛЕВОМИЦЕТИНА

• 3.1. Приготовление исходного раствора левомицетина с массовой концентрацией 10 мг/дм³

Взвешивают в стакане 10 мг левомицетина, добавляют 25 см³ дистиллированной воды, перемешивают. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³. Ополаскивают стакан дистиллированной водой, раствор переносят в мерную колбу, доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

• 3.2 Приготовление раствора левомицетина с массовой концентрацией 0,1 мг/ дм³

1 см³ раствора, приготовленного по п. 3.1, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки дистиллированной водой.

• 3.3 Приготовление контрольного раствора левомицетина с массовой концентрацией 0,001 мг/дм

1 см³ раствора, приготовленного по п. 3.2, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки водой.

Погрешность приготовления контрольного раствора ±5 %.

• 4 ПРИГОТОВЛЕНИЕ КОНТРОЛЬНОГО РАСТВОРА КОФЕИНА

4.1 Взвешивают в стакане около 200 мг кофеина, добавляют в стакан 25 мл дистиллированной воды, перемешивают. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³. Ополаскивают стакан дистиллированной водой, переносят ее в мерную колбу, доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Содержание кофеина в исходном растворе (Со, мг/дм³) рассчитывают по формуле где т - масса кофеина, мг;

Г₁₀₀ - вместимость мерной колбы, К = 100 см³.

• 4.2 Приготовление контрольного раствора кофеина с массовой концентрацией 10 мг/дм³.

1 см³ исходного раствора кофеина переносят пипеткой вместимостью 1 см³ в мерную колбу вместимостью 200 см³. Доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают.

Погрешность приготовления контрольного раствора ±1,5 %.