Методика поверки «ГСИ.Хроматографы жидкостные Elute» (MП-242-2421-2021)

Федеральное государственное унитарное предприятие

«Всероссийский научно-исследовательский институт метрологии им. Д.И. Менделеева» ФГУП «ВНИИМ им.Д.И.Менделеева

f.

I I

вниим

7809flV^s‘

i

i

Государственная система обеспечения единств I

I

i I

! ' I

I • I

i i

i i i

Хроматографы жидкостные Elute i •                  ?           ' .                  ; ; • I

Методика поверки

МП-242-2421-2021

И.о. руководителя отдела Государственных эталонов в области физико-химическихизмеррний ФГУП «ВНИИМ иМ.

енделеева»

I

A.B.Колобова

С. Петербург 2021 г.

Настоящая методика распространяется на хроматографы жидкостные Elute, (модификации Elute SP, Elute UHPLC, Elute OLE и Elute НТ) co следующими детекторами:

• - диодно-матричный детектор (Elute DAD);

• - спектрофотометрический детектор с изменяемой длиной волны (UVD 2.1S фирмы "Knauer Wissenschaftliche Geratebau GmbH")

' • г ' :                        I i I

и устанавливает методы и средства их первичной поверки при вводе в эксплуатацию и после ремонта и периодической поверки в процессе эксплуатации.

• ¹                                         •                                       i ‘ I

Прослеживаемость результатов измерений, получаемых с помощью хроматографа, осуществляется при реализации на нем методов (методик) измерений путем использования стандартных образцов, прослеживаемых к государственным первичным эталонам единиц массовой (молярной) доли и массовой (молярной) концентрации по ГОСТ 8.735.0-2011 «Государственная поверочная схема для средств измерений содержания компонентов в жидких и твердых веществах и материалах. Основные положения»

Метод, обеспечивающий реализацию методики поверки - косвенное измерение поверяемым средством величины, воспроизводимой стандартным образцом.

Операции, связанные с опробованием и определением метрологических характеристик, проводят для каждого из детекторов, входящих в комплект поставки хроматографа.

Методикой поверки допускается проведение поверки меньшего количества детекторов из состава хроматографа с обязательным указанием в свидетельстве о поверке сведений о поверенных детекторах.

i

1.1 При проведении поверки должны выполняться операции, указанные в таблице 1. Таблица 1 - Операции поверки

• 2.1   При проведении поверки соблюдают следующие условия:

• - температура окружающего воздуха от 15 до 30 °C; I

• - относительная влажность воздуха не более 80 %.

• 3.1    К работе с хроматографами и проведению поверки допускаются лица, ознакомленные с руководством по эксплуатации поверяемого хроматографа и инструкциями (руководствами) по применению средств измерений, стандартных образцов и вспомогательных средств поверки и имеющие квалификацию не ниже бакалавра (инженера) и прошедшие инструктаж по технике безопасности.

⁴               ’              ' I i

• 4.1 При проведении поверки применяют средства, указанные в таблице 2.

Таблица 2 - Средства поверки

• 4.2. Допускается применение других средств поверки, обеспечивающих определение метрологических характеристик поверяемых хроматографов с требуемой точностью.

• 4.3. Все средства измерений, используемые при поверке, должны иметь свидетельства о поверке, а ГСО и химические реактивы (растворители) - действующие паспорта.

При проведении поверки соблюдают следующие требования безопасности:

• 5.1   Хроматограф должен быть установлен в хорошо проветриваемом помещении.

Г t 1                        ! !

• 5.2. При проведении поверки нельзя прикасаться к частям корпуса хроматографа, на которые нанесены предупреждающие знаки.

• 5.3. При проведении поверки требуется следовать правилам безопасности, изложенным в разделе 1 Руководства по эксплуатации хроматографов

• 6.1   При внешнем осмотре устанавливают соответствие хроматографов следующим требованиям:

отсутствие внешних повреждений, влияющих на работоспособность; исправность органов управления;

четкость надписей на лицевой панели.

отсутствие протечек в системе, отсутствие пузырей воздуха в питающих трубках

маркировка должна соответствовать требованиям эксплуатационной документации.

Хроматограф считают выдержавшими внешний осмотр, если он соответствуют указанным выше требованиям.

Подготовка к поверке и опробование хроматографа

11еред проведением поверки выполняют следующие подготовительные

• - приготовить по 200 мл подвижных фаз А, Б из воды и ацетонитрила соответственно.

• - согласно инструкции по применению стандартного образца состава раствора антрацена в ацетонитриле ГСО 8749-2006 приготовить контрольный раствор с массовой концентрацией антрацена 10 мг/см³, используя в качестве растворителя ацетонитрил для жидкостной хроматографии кв. ОСЧ. i

• 7.2. Параметры хроматографа и детектора должны быть установлены в соответствии с руководством по эксплуатации. Используют настройки метода указанные в таблице 3 для соответствующего детектора, кондиционируют хроматографическую колонку и детектор в течение 30 минут до начала контрольных измерений.

• 7.3. На рисунке 1 показано окно ПО с результатами измерений. Под термином площадь пика (Area Target Cmpd) понимают рассчитанную площадь под кривой сигнала при появлении пика и автоматическом интегрировании в программе обработки. Под термином время удерживания (RT Target Cmpd) понимают время появления хроматографического пика от начала анализа, автоматически посчитанное программой обработки. Под термином «Уровень флуктуационных шумов нулевого сигнала» понимают значение равное амплитуде повторяющихся колебаний нулевого сигнала с периодом не более 20 с.

Рисунок 1 - Окно ПО Compass Quant Analysis с результатами измерений

• 7.2 Опробование (самотестирование прибора) проводится в автоматическом режиме после включения питания. В случае успешного прохождения тестирования на дисплее появляется стартовое окно программы управления прибором.

• 8.1   Проверка программного обеспечения (ПО) хроматографов проводится путем установления соответствия ПО хроматографов, представленных на поверку, тому ПО, которое было зафиксировано (внесено в банк данных) при испытаниях в целях утверждения типа.

• 8.2 Для проверки соответствия ПО выполняют следующие операции

8.2.1 Окно с номером версии ПО Hystar выводится на дисплей с помощью команды Help=> About Compass Hystar. Вид окна приведен на рисунке 2. Версия ПО приведена в строке Version.

? ’ *              ? f ^! I

• • ! ■ •

,                               »

I !

:                   «           ‘ i                        I I

.                                                          •:                             ! I ! i i

Рисунок 2 - Вид окна с версией ПО Compass Hystar

<                                                                               •                  1: i !                ¹ I t I

8.2.2 Для того, чтобы определить версию модуля программного обеспечения в ПО Compass

DataAnalysis, необходимо в строке меню ПО выбрать пункт Help, в раскрывшемся меню выбрать About Compass DataAnalysis.

:                     • ’ ’ J                           • •

После этого появится окно с версией и сборкой ПО вида:

Рисунок 3 - Вид окна с версией ПО Compass DataAnalysis

• 8.2.3 Для того, чтобы определить версию модуля программного обеспечения в ПО Compass QuantAnalysis, необходимо в строке меню ПО выбрать пункт Help, в раскрывшемся меню выбрать About Compass QuantAnalysis.

После этого появится окно с версией и сборкой ПО вида:

: I         ||

Рисунок 4 - Вид окна с версией ПО Compass QuantAnalysis

,                                         ! '                               I » I

• 8.2.4 Для того, чтобы определить версию модуля встроенного программного обеспечения необходимо навести курсор на соответствующий модуль (Насос (Elute Pump), термостат колонок (Elute Column Oven), автосамплер (Elute Autosampler), детектор (UVD 2.1S Detector или Elute Detector)) нажать правой кнопкой мыши выбрать Maintenance затем System information для обеспечения.

  каждого модуля появится окно с версией встроенного программного 1 •                               ' i

  I

  I

  

  г

  
  

  Рисунок 5 - Версия встроенного ПО для детектора UVD2.1S .=   ^: I «til

Рисунок 7 - Версия встроенного ПО для насоса.

Рисунок 8 - Версия встроенного ПО для автосамплера X ill

U’.'eUodSet - лгг>И» labte 0маф.->гЫ>п OQu4< Data V««.vi

Wavelength Accuracy

Hdmum line at 36091

10-2000п»

Njrfetr of ihuax »o«tet«-

Optical Properties ----------------------_r

Op6calbend«idthM6S6nm^H): 24. » :           ft ".   .

Оо»с|1Ь»памЛ.и2Мг«п[Ял'НМУ 22«

integration time range

Рисунок 8- Версия встроенного ПО для детектора Elute DAD.

I .

• 9.1 Следовать условиям эксперимента согласно таблице 3 для конфигурации оборудования с детектором UVD 2.1S и/или Elute DAD.

Таблица 3 - Перечень условий эксперимента

Таблица 4 - Условия поверки хроматографов с детектором UVD 2.1S

• 9.2 Определение предела обнаружения и относительного СКО выходного сигнала.

• 9.2.1 Поместить в автосамплер контрольный раствор и произвести 6 последовательных измерений.

• 9.2.2  С помощью программного обеспечения Compass Quant Analysis определить площади пиков и время удерживания и провести обработку полученных результатов в соответствии с указаниями п. 9.2.3.

• 9.2.3 Порядок обработки результатов измерений.

• 9.2.3.1 Для расчета ОСКО выходного сигнала используются значения площадей пиков и времен удерживания. При этом недостоверные результаты измерений, которые можно оценить как выбросы (см. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002, п. 3.21; ГОСТ Р 8.736-2011), отбраковываются и не учитываются в расчетах. В случае обнаружения выбросов проводят необходимое дополнительное число измерений.

• 9.2.3.2 Расчет ОСКО проводят в программе MS Excel, либо вручную по формуле:

  
  t(N-N_k)²

  2Z1

  
  

  (1)

где: N- среднее арифметическое результатов п- измерений;

N* - k-e значение результата измерений;

п - число измерений.

• 9.2.3.3 Уровень (размах) флуктуационных шумов нулевого сигнала (Д_х ) измеряют в программе Compass DataAnalysis на участке хроматограммы, предшествующем выходу контрольного вещества и принимают равным максимальной амплитуде повторяющихся колебаний нулевого сигнала с периодом не более 20 с (при этом единичные выбросы не учитываются).

• 9.2.3.4 Для определения предела детектирования используют значение N, полученное в пункте 9.2.3.2 для площади пика и значение Дх, определенное в пункте 9.2.3.3.

Предел детектирования в г/см³ рассчитывают по формуле:

_г _ 2хДХхбх60 '-мин^- XxV

где:

ДХ - уровень флуктуационных шумов;

V - скорость элюента, см³/мин;

G - количество контрольного вещества в граммах, G = 10'⁹хСхУ_доз;

С - массовая концентрация контрольного вещества в мг/дм³;

Удоз - объём вводимой пробы контрольного вещества, мкл.

• 9.3 Определение относительного изменения выходного сигнала 6t (площади пика) за 4 часа непрерывной работы.

• 9.3.1 Через 4 часа после определения ОСКО выходных сигналов повторяют измерения в соответствии с пунктом 9.2.1 и пунктом 9.2.2.

• 9.3.2 Относительное изменение выходного сигнала (в процентах) за 4 часа непрерывной работы хроматографа рассчитывают по формуле:

6₁ = (Х₁-Х)Ч00/Х                                   (3)

где:   X - среднее значение площади пика (п=6) в начальный момент времени;

X_t- среднее значение площади пика (п=6) через 4 часа непрерывной работы.

• 10.1 Результаты поверки считаются положительными, если полученные значения ОСКО площади пика, ОСКО времени удерживания и предела детектирования не превышают значений, указанных в таблице 6.

Таблица 6 - Предельные допускаемые значения метрологических характеристик

• 11.1 Данные, полученные при поверке, оформляются в форме протокола в соответствии с требованиями, установленными в организации, проводящей поверку. Рекомендуемая форма записи результатов измерений, включаемых в протокол поверки, приведена в приложении А.

• 11.2 Хроматограф, удовлетворяющий требованиям настоящей методики поверки, признается годным к применению. Хроматограф, не удовлетворяющий требованиям настоящей методики, не допускается к применению.

• 11.3  Результаты поверки средств измерений подтверждаются сведениями о результатах поверки средств измерений, включенными в Федеральный информационный фонд по обеспечению единства измерений. По заявлению владельца средства измерений или лица, представившего его на поверку, на средство измерений наносится знак поверки, и (или) выдается свидетельство о поверке средства измерений, и (или) в паспорт средства измерений вносится запись о проведенной поверке, заверяемая подписью поверителя и знаком поверки, с указанием даты поверки, или выдается извещение о непригодности к применению средства измерений.

• 11.4 Знак поверки наносится на переднюю панель хроматографа и (или) на свидетельство о поверке.

Рисунок 6 - Версия встроенного ПО для термостата колонок

11.1. Данные, полученные при поверке, оформляются в форме протокола в соответствии с требованиями, установленными в организации, проводящей поверку. Рекомендуемая форма записи результатов измерений, включаемых в протокол поверки, приведена в приложении А.                                                      ■    ■        ' и

• 11.2 Хроматограф, удовлетворяющий требованиям настоящей методики поверки, признается годным к применению. Хроматограф, не удовлетворяющий требованиям настоящей методики, не допускается к применению.

• 11.3  Результаты поверки средств измерений подтверждаются сведениями о результатах поверки средств измерений, включенными в Федеральный информационный фонд по обеспечению единства измерений. По заявлению владельца средства измерений или лица, представившего его на поверку, на средство измерений наносится знак поверки, и (или) выдается свидетельство о поверке средства измерений, и (или) в паспорт средства измерений вносится запись о проведенной поверке, заверяемая подписью поверителя и знаком поверки, с указанием даты поверки, или выдается извещение о непригодности к применению средства измерений.

■                                                 - i '

о

I

t                           ‘         ! I

j . :

ПРИЛОЖЕНИЕ А (рекомендуемое)

i *                       Г N • Г ’

Протокол поверки

•' ! ■

Хроматограф жидкостной Elute

Зав. №________________________________________________________

Принадлежит_______

ИНН владельца______________________________________________________________

Дата выпуска________________________________ •

Дата поверки______________________________

Условия поверки:

температура окружающего воздуха °C; относительная влажность_____________%.

£ • :      ! hl

Документ, по которому проведена поверка___________________________________________

Средства поверки__________________________________________________________________

Результаты внешнего осмотра и опробования

<                                                •       .                                     :         i

I •

Результаты проверки соответствия ПО__________ ^:    -___________________________

-j О     гп

! ³

s .                               i . i

Результаты определения метрологических характеристик

:        I

Таблица 2 - Относительное СКО параметров выходного сигнала (детектор__________)

(детектор

)

Таблица 3- Относительное изменение выходного сигнала за 4 часа непрерывной работы

t

14